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大鼠終板軟骨細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 15:19:07瀏覽次數(shù):267

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 椎間盤組織
大鼠終板軟骨細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:人直腸平滑肌細(xì)胞原代細(xì)胞5×105人膽囊微血管內(nèi)皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105人膽囊成纖維細(xì)胞原代細(xì)胞5×105人膽囊平滑肌細(xì)胞原代細(xì)胞5×105人膽囊動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105

詳細(xì)介紹

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自椎間盤終板軟骨組織;椎體終板是椎體在生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中,椎體上下面的骨骺板骨化停止后形成骨板,呈輕度凹陷,即為骨性終板。椎體終板的中央仍為一薄層透明軟骨覆蓋,并終生存在,即為軟骨終板,上下軟骨終板與髓核和纖維環(huán)連接共同構(gòu)成椎間盤。椎體終板構(gòu)成了椎間盤的上下邊界,位于椎體中心的松質(zhì)骨和椎間盤之間。是由軟骨下骨和厚度相當(dāng)?shù)母采w其上的軟骨組成。主要作用是防止椎間盤髓核組織嵌入椎體,同時(shí)具有平衡分散應(yīng)力的作用。成熟的終板軟骨細(xì)胞多2-8個(gè)成群分布于軟骨陷窩內(nèi),這些終板軟骨細(xì)胞由同一個(gè)母細(xì)胞分裂增殖而成,稱為同源細(xì)胞群。電鏡下,終板軟骨細(xì)胞有突起和皺褶,細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有大量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達(dá)的高爾基復(fù)合體及少量的線粒體。在組織切片中,終板軟骨細(xì)胞收縮為不規(guī)則形,在軟骨囊和細(xì)胞之間出現(xiàn)較大的腔隙。體外培養(yǎng)的終板軟骨細(xì)胞對(duì)于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用膠原 - 中性dan白聯(lián)合消化并結(jié)合軟骨細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    3-4天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  梭形、多角形

傳代特性  可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來(lái)源

大鼠終板軟骨細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

椎間盤組織

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

半胱氨8相關(guān)蛋白2抗體 環(huán)指蛋白1封閉多肽 小鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA試劑盒

鈣粘蛋白28抗體 異戊烯半胱氨羧基甲基轉(zhuǎn)移封閉多肽 小鼠可溶性P選擇(sP-selectin)試劑盒 ELISA

轉(zhuǎn)錄共激活因子130抗體 磷化原癌基因蛋白c-kit封閉多肽 小鼠S100蛋白(S-100)ELISA檢測(cè)試劑盒

SMARCA5單克隆抗體 核苷轉(zhuǎn)氫封閉多肽 小鼠白介1(IL-1)ELISA Kit

轉(zhuǎn)錄起始因子TFIID亞基6抗體 3-磷甘油醛脫氫多肽 小鼠白介1β (IL-1β)ELISA試劑盒

煙堿型乙酰受體γ抗體 鋅指蛋白395封閉多肽 小鼠肌紅蛋白(MYO/MB)試劑盒 ELISA

紅細(xì)胞生成抗體 核苷磷化1封閉多肽 小鼠血栓B2(TXB2)ELISA檢測(cè)試劑盒

SHROOM1蛋白抗體 熱休克蛋白B2封閉多肽 小鼠乙酰(ACH)ELISA Kit

碳酐13抗體 三羥酰脫氫封閉多肽 小鼠白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒

HDHD3蛋白抗體 跨膜蛋白BRI封閉多肽 小鼠白血病抑制因子受體(LIFR)試劑盒 ELISA

神經(jīng)內(nèi)分泌調(diào)節(jié)肽VGF抗體 磷化雄激受體封閉多肽 大鼠活化A受體抗體(ACV-RAb)ELISA檢測(cè)試劑盒

核受體0相關(guān)蛋白B家族2抗體 通用轉(zhuǎn)錄因子ⅡA亞基2封閉多肽 大鼠腦紅蛋白(NGB)ELISA Kit

RRP12樣蛋白抗體 eIF4GII蛋白封閉多肽 大鼠血小板生成(TPO)ELISA試劑盒

烯酰水合1抗體 脫氫2型封閉多肽 大鼠可溶性凋亡相關(guān)因子(sFAS/Apo-1)試劑盒 ELISA

TBC結(jié)構(gòu)域家族D15蛋白抗體 周期樣Y1封閉多肽 大鼠Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)ELISA檢測(cè)試劑盒

磷化有絲分裂激B/C抗體 磷化PDZ連接激/T-LAK細(xì)胞源蛋白激封閉多肽 大鼠甘露糖結(jié)合蛋白/甘露糖結(jié)合凝集(MBP/MBL) ELISA Kit

跨膜蛋白67抗體 RASSF5封閉多肽 大鼠白介7(IL-7)ELISA試劑盒

磷化心肌肌鈣蛋白抗體 異質(zhì)核糖核蛋白U封閉多肽 大鼠絲氨/蘇氨蛋白磷(STK) 試劑盒 ELISA
大鼠終板軟骨細(xì)胞兔腸巨噬細(xì)胞英文名稱:兔腸巨噬細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

gang門內(nèi)括約肌平滑肌細(xì)胞英文名稱:兔gang門內(nèi)括約肌平滑肌細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

兔腸道干細(xì)胞細(xì)胞英文名稱:兔腸道干細(xì)胞細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

兔腸粘膜上皮細(xì)胞英文名稱:兔腸粘膜上皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

兔腹腔巨噬細(xì)胞英文名稱:兔腹腔巨噬細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

兔腎小管上皮細(xì)胞英文名稱:兔腎小管上皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

兔腎小球系膜細(xì)胞英文名稱:兔腎小球系膜細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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