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兔外周血巨噬細(xì)胞

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更新時間:2023-04-21 12:43:39瀏覽次數(shù):279

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 外周血
兔外周血巨噬細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:小鼠骨髓巨噬細(xì)胞永生化原代細(xì)胞永生化1×106雞胚成纖維細(xì)胞永生化原代細(xì)胞永生化1×106豬主動脈內(nèi)皮細(xì)胞永生化原代細(xì)胞永生化1×106豬小腸上皮細(xì)胞永生化原代細(xì)胞永生化1×106雪貂鼻腔粘膜上皮細(xì)胞永生化原代細(xì)胞永生化1×106

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

兔外周血巨噬細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

外周血

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞,我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞,在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。巨噬細(xì)胞屬免疫細(xì)胞,有多種功能,是研究細(xì)胞吞噬、細(xì)胞免疫和分子免疫學(xué)的重要對象。巨噬細(xì)胞較易獲得,便于培養(yǎng),并可進行純化。巨噬細(xì)胞屬不繁殖細(xì)胞群,在條件適宜下可生活2-3周,多用做原代培養(yǎng),難以長期生存。巨噬細(xì)胞(Macrophages)是一種位于組織內(nèi)的白血球,源自單核細(xì)胞,而單核細(xì)胞又來源于骨髓中的前體細(xì)胞。巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞皆為吞噬細(xì)胞,在脊椎動物體內(nèi)參與非特異性防衛(wèi)(先天性免疫)和特異性防衛(wèi)(細(xì)胞免疫)。它們的主要功能是以固定細(xì)胞或游離細(xì)胞的形式對細(xì)胞殘片及病原體進行噬菌作用(即吞噬以及消化),并激活淋巴球或其他免疫細(xì)胞,令其對病原體作出反應(yīng)。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用取外周血、通過密度梯度離心法、差速貼壁、細(xì)胞因子誘導(dǎo)法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)CD68免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  巨噬細(xì)胞樣

傳代特性  屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群

消化液  (12mM)

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

SNRNP200蛋白抗體 磷化堿性成纖維細(xì)胞生長因子受體1封閉多肽 小鼠P物質(zhì)(SP)ELISA試劑盒

甲基化組蛋白H3(tri methyl K4)單克隆抗體 自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3封閉多肽 小鼠血管活性腸肽(VIP)試劑盒ELISA

組蛋白去乙?;?/span>9抗體 含丙氨酰tRNA合成結(jié)構(gòu)域1封閉多肽 小鼠甲狀腺過氧化物(TPO)ELISA檢測試劑盒

英文名稱: ACE2 內(nèi)皮細(xì)胞纖溶原激活抑制蛋白1封閉多肽 小鼠αL巖藻糖苷(AFU)elisa試劑盒

腫瘤細(xì)胞調(diào)亡/腫瘤壞死因子受體死亡受體6抗體 線粒體釋放因子1樣蛋白封閉多肽 小鼠血管舒緩激肽(BK)試劑盒elisa

半乳糖凝集3抗體 肌鈣蛋白C2封閉多肽 小鼠胰島原(PI)檢測試劑盒elisa

G蛋白偶聯(lián)受體GPR91蛋白抗體 谷氨酰-脯氨酰-tRNA合成封閉多肽 小鼠抗IgE受體抗體ELISA試劑盒

轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBP β抗體 棕櫚酰轉(zhuǎn)移GODZ封閉多肽 小鼠抗IVIgG抗體試劑盒ELISA

磷脂磷2b抗體 金屬硫蛋白3封閉多肽 小鼠抗心肌抗體(AMA)ELISA檢測試劑盒

RUSC1抗體 磷化非受體型酪氨蛋白激Tnk1封閉多肽 小鼠銅藍(lán)蛋白(CP/CER)elisa試劑盒

轉(zhuǎn)化生長因子β4抗體 MDM1蛋白封閉多肽 小鼠p53(p53)試劑盒elisa

PLEKHA7蛋白抗體 單鏈DNA結(jié)合蛋白2封閉多肽 小鼠環(huán)磷鳥苷(cGMP)檢測試劑盒elisa

PSMα7抗體 CD101封閉多肽 小鼠一氧化氮合成(NOS)ELISA試劑盒

核糖體p70 S6蛋白激抗體 促分裂原誘導(dǎo)基因6蛋白/Mig-6封閉多肽 小鼠誘導(dǎo)型一氧化氮合成(iNOS)試劑盒ELISA

磷化組蛋白去乙?;?/span>5抗體 轉(zhuǎn)移生長因子β受體1封閉多肽 小鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成(eNOS)ELISA檢測試劑盒

細(xì)胞分裂周期相關(guān)蛋白5抗體 核轉(zhuǎn)錄因子SOX14封閉多肽 小鼠組胺(HIS)elisa試劑盒

肝血管生成相關(guān)蛋白4抗體 間隙連接蛋白37封閉多肽 小鼠脂蛋白相關(guān)磷脂A2(Lp-PL-A2)試劑盒elisa

溶質(zhì)載體蛋白家族21成員2抗體 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白RER1封閉多肽 小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)檢測試劑盒elisa
兔外周血巨噬細(xì)胞HCC827人非小肺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HCC827細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

HCC827人非小肺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HCC827細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

HCC827+LUC人非小肺癌熒光標(biāo)記細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HCC827+LUC細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

HCC827+LUC人非小肺癌熒光標(biāo)記細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HCC827+LUC細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

HCC-94人子宮鱗癌(高分化) 細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HCC-94細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

HCC-94人子宮鱗癌(高分化) 細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HCC-94細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

hccc-9810人膽管型肝癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:hccc-9810細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

 


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