上海吉至生化科技有限公司

主營(yíng)產(chǎn)品: 潮霉素b,DTT二硫蘇糖醇,Albumin BovineⅤ 牛血清白蛋白Ⅴ,Zeocin 博萊霉素 1.25ml -20℃ (125mg),IPTG 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷 進(jìn)口 100g

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吉試劑——紅細(xì)胞裂解液注意事項(xiàng)與操作步奏

2018-10-12  閱讀(499)

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【詳細(xì)說明】

產(chǎn)品描述

  本產(chǎn)品采用了一種簡(jiǎn)便易行的方式,經(jīng)配方優(yōu)化保證既不破壞白細(xì)胞又能充分的將紅細(xì)胞裂解去除,適用于人,大小鼠等哺乳動(dòng)物新鮮血液。通常情況下,可以獲得血液樣品中全部白細(xì)胞的 80% 以上并充分保證白細(xì)胞的生物活性。

  本產(chǎn)品主要成分是氯化銨,即用型溶液,能快速、有效的裂解紅細(xì)胞,富集分離白細(xì)胞。獲得的白細(xì)胞生物活性好,可直接應(yīng)用于流式細(xì)胞術(shù),核酸或蛋白的提取,PCR等下游實(shí)驗(yàn)。

運(yùn)輸與保存方法

冰袋(wet ice)運(yùn)輸。2-8℃保存。

注意事項(xiàng)

1)本試劑適用于從 1μl  10ml 的血液樣品中分離白細(xì)胞,獲得的白細(xì)胞可進(jìn)行下游實(shí)驗(yàn)。

2)為了提取到好的核酸或蛋白,請(qǐng)使用新鮮血液或保存時(shí)間低于7天的血液。如產(chǎn)生血凝塊,將其去除。盡量采用抗凝管采集樣本。

3)通常情況下,血液樣品與紅細(xì)胞裂解液按 1  3 比例裂解,對(duì)一些特殊病例如白血病、紅細(xì)胞增多癥等,建議采用 1  4 或更高比例以保證結(jié)果。

4)本品重要成分是氯化銨,不能保證有效裂解有核紅細(xì)胞,如鳥類,爬行動(dòng)物、魚類等血液中的紅細(xì)胞。

5)本品也可用于哺乳動(dòng)物組織中紅細(xì)胞的裂解。 

操作步驟

  使用前先將低溫保存紅細(xì)胞裂解液平衡室溫。然后在血液樣品中加入3倍體積紅細(xì)胞裂解液 (例如,300 μl血液加入900 μl紅細(xì)胞裂解液),顛倒混勻,室溫放置5min,期間再顛倒混勻幾次 ,10000rpm離心1min (若是離心機(jī)高轉(zhuǎn)速不允許,可以3000rpm離心5min),吸去上清。用適當(dāng)?shù)木彌_液(如PBS, pH 7.2~7.4)清洗一遍。離心后留下白細(xì)胞沉淀進(jìn)行后續(xù)的操作。

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