DiI, DiO, DiD和DiR作為一類長(zhǎng)鏈的親脂性二烷基碳菁類染料（Dialkylcarbocyanines）熒光染料家族，用于標(biāo)記細(xì)胞膜以及其他脂溶性生物結(jié)構(gòu)。作為一類環(huán)境敏感型熒光染料，當(dāng)它們與膜結(jié)合或者與親脂性生物分子（例如蛋白質(zhì)，雖然在水中其熒光強(qiáng)度很弱）結(jié)合時(shí)，其熒光強(qiáng)度顯著增強(qiáng)。一旦進(jìn)入細(xì)胞后，它們?cè)诩?xì)胞內(nèi)質(zhì)膜中逐步擴(kuò)散，于最佳濃度條件下可將整個(gè)細(xì)胞均勻染色。這些染料具很高的淬滅系數(shù)，偏光依賴性和很短的激發(fā)壽命。

四種染料呈現(xiàn)不同的熒光顏色，DiI（橙色熒光）DiO（綠色熒光）、DiD（紅色熒光）、DiR（深紅色熒光），為活細(xì)胞多色彩熒光成像分析和流式細(xì)胞術(shù)提供了一種便捷的工具。DiO和DiI分別用標(biāo)準(zhǔn)FITC和TRITC濾光器檢測(cè)，可結(jié)合使用。DiD可被633 nm氦-氖（He-Ne）激光激發(fā)，具有比DiI更長(zhǎng)的激發(fā)和發(fā)射光波長(zhǎng)，特別適合用于標(biāo)記具本底熒光的細(xì)胞和組織。而DiR在體內(nèi)活體成像或者示蹤中意義非凡，因其所發(fā)射的紅外光可以高效地穿過細(xì)胞和組織，并且在紅外光范圍內(nèi)，其本底熒光水平很低。

本品以DiR的碘鹽形式提供，

英文名：1,1-dioctadecyl-3,3,3,3-tetramethylindotricarbocyaineiodide，

純度≥95%，適用于熒光檢測(cè)研究。

溫馨提示：本產(chǎn)品由陜西新研博美生物科技有限公司提供，該產(chǎn)品僅作科研實(shí)驗(yàn)使用，不支持臨床等研究。

廠  家：陜西新研博美生物科技有限公司

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使用方法：

1、染色液制備：

（1）配置DMSO 或 EtOH 儲(chǔ)存液：儲(chǔ)存液用 DMSO 或 EtOH 配置濃度 1～5 mM。

注：未使用的儲(chǔ)存液分裝儲(chǔ)存在-20℃，避免反復(fù)凍融。

（2）工作液制備：用合適的緩沖液（如：無血清培養(yǎng)基，HBSS 或 PBS）稀釋儲(chǔ)存液，配制濃度為 1～5μM 的工作液。

注：工作液最終濃度建議根據(jù)不同細(xì)胞系和實(shí)驗(yàn)體系來優(yōu)化。 建議從推薦濃度的 10 倍范圍內(nèi)開始*濃度的摸索。

2、懸浮細(xì)胞染色：

（1）加入適當(dāng)體積的染色工作液重懸細(xì)胞，使其密度為 1×10 6 /mL。

（2）37℃ 孵育細(xì)胞 2～20 min，不同的細(xì)胞最佳培養(yǎng)時(shí)間 不同。可以20 min 作為起始孵育時(shí)間，之后優(yōu)化體系以得 到均一的標(biāo)記結(jié)果。

（3）孵育結(jié)束，1000～1500 rpm離心5 min。傾倒上清液， 再次緩慢加入37 ℃預(yù)熱的生長(zhǎng)培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。

（4）重復(fù)步驟（3）兩次以上。

3、貼壁細(xì)胞的染色：

（1）將貼壁細(xì)胞培養(yǎng)于無菌蓋玻片上。

（2）從培養(yǎng)基中移走蓋玻片，吸走過量培養(yǎng)液，但表面要 保持濕潤(rùn)。

（3）在蓋玻片的一角加入 100 μL 的染料工作液，輕輕晃動(dòng) 使染料均勻覆蓋所有細(xì)胞。

（4）37℃ 孵育細(xì)胞 2～20 min，不同的細(xì)胞最佳培養(yǎng)時(shí)間不同?？梢?0 min作為起始孵育時(shí)間，之后優(yōu)化體系以得到均一的標(biāo)記結(jié)果。

（5）吸干染料工作液，用培養(yǎng)液洗蓋玻片 2～3 次，每次用預(yù)溫的培養(yǎng)基覆蓋所有細(xì)胞，孵育5～10 min，然后吸干培養(yǎng)基。但要使表面保持濕潤(rùn)。

溫馨提示：本產(chǎn)品由陜西新研博美生物科技有限公司提供，該產(chǎn)品僅作科研實(shí)驗(yàn)使用，不支持臨床等研究。

純 度：95%

儲(chǔ)存/保存方法：−20°C干燥避光保存，產(chǎn)品有效期為12個(gè)月

技術(shù)指標(biāo)：

Ex(nm)：748

Em(nm)：780

注意事項(xiàng)：

1、熒光染料均存在淬滅問題，請(qǐng)盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。

2、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作

基本信息：

別 名：細(xì)胞膜熒光探針DiR, DiR細(xì)胞膜染料, DiR 碘化物；DiIC18(7)

外 觀：藍(lán)色至深藍(lán)色油狀固體

可溶性/溶解性：溶于DMF，DMSO，甲醇

參考文獻(xiàn)：Cheng Z, et al. (2004). Differential control over postganglionic neurons in rat cardiac ganglia by NA and DmnX neurons: anatomical evidence. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol 286, R625-33; Koo YE, et al. (2004). Real-time measurements of dissolved ox

分子結(jié)構(gòu)圖：

DiR 結(jié)構(gòu)式