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技術(shù)文章

Mag-Fura-2 AM鎂離子熒光探針130100-20-8物理特性

閱讀:139          發(fā)布時(shí)間:2022-1-6

名稱:Mag-Fura-2 AM, Cell Permeant 鎂離子熒光探針

CAS:130100-20-8

化學(xué)名:5-Oxazolecarboxylic acid, 2-[5-[2-[(acetyloxy)methoxy]-2-oxoethoxy]-6-[bis[2-[(acetyloxy)methoxy] -2-oxoethyl]amino]-2-benzofuranyl]-(acetyloxy)methyl ester

同義名:Furaptra, AM ester

分子式:C30H30N2O19

分子量:722.56 g/mol

結(jié)構(gòu)式:


外觀:黃色固體

純度:≥90%

Ex/Em:336/503 nm

溶解性:溶于DMSO

保存:-20oC干燥避光保存,至少一年有效。

運(yùn)輸:冰袋運(yùn)輸

產(chǎn)品描述:Mag-Fura-2 AM是一種胞內(nèi)鎂離子指示劑,屬于紫外激發(fā)的比率型探針,與鎂離子結(jié)合的Kd值為1.9mM。與Fura-2類似,Mag-Fura-2的激發(fā)波長歷經(jīng)藍(lán)色遷移從369nm到330nm。Mag-Fura-2 AM具細(xì)胞膜滲透性,只需簡單孵育,即可加載進(jìn)入細(xì)胞。


使用方法:

1.儲存液制備

取一管低溫保存的Mag-Fluo-4 AM,置于室溫回溫至少20min。之后加入高質(zhì)量無水DMSO配制成1~5mM儲存液,比如50μgMag-Fluo-4 AM(Mw:817.65 g/mol)溶于12μl DMSO,充分溶解后,即得到5mM儲存液。

【注意】未使用的儲存液分裝儲存在-20℃,避免反復(fù)凍融,且要避光保存。盡快使用完。

2.操作步驟

【注意】以下使用方法僅作參考,需根據(jù)具體的細(xì)胞類型和實(shí)驗(yàn)要求做出調(diào)整。加載溫度范圍是RT~37℃,更高溫度會(huì)提高加載速度,但更低溫度能最小化染料的內(nèi)在化現(xiàn)象。表面活性劑Pluronic®F-127有時(shí)加入能促進(jìn)AM探針在水溶性緩沖液內(nèi)的均勻分散。

2.1 在所需溫度(25℃~37℃)預(yù)孵育細(xì)胞10min,使其離子梯度達(dá)到穩(wěn)定和平衡。

2.2 取4μl Mag-Fluo-4 AM儲存液和5μl 20% Pluronic®F-127,加入1ml細(xì)胞培養(yǎng)液,劇烈漩渦混勻得到均勻的探針分散液。

2.3 取250μl上述制備的探針分散液加入750μl含細(xì)胞的培養(yǎng)基內(nèi),混勻,此時(shí)得到終濃度為1~5μM的工作液,根據(jù)起始母液濃度來確定。

2.4 根據(jù)需求探針孵育15~60min。

2.5 細(xì)胞清洗3次,之后繼續(xù)孵育30min以保證細(xì)胞內(nèi)的探針*去酯化。之后選擇合適的儀器,進(jìn)行熒光測定。


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