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Mag-Fura-2 AM鎂離子熒光探針130100-20-8物理特性
閱讀:139 發(fā)布時(shí)間:2022-1-6名稱:Mag-Fura-2 AM, Cell Permeant 鎂離子熒光探針
CAS:130100-20-8
化學(xué)名:5-Oxazolecarboxylic acid, 2-[5-[2-[(acetyloxy)methoxy]-2-oxoethoxy]-6-[bis[2-[(acetyloxy)methoxy] -2-oxoethyl]amino]-2-benzofuranyl]-(acetyloxy)methyl ester
同義名:Furaptra, AM ester
分子式:C30H30N2O19
分子量:722.56 g/mol
結(jié)構(gòu)式:
外觀:黃色固體
純度:≥90%
Ex/Em:336/503 nm
溶解性:溶于DMSO
保存:-20oC干燥避光保存,至少一年有效。
運(yùn)輸:冰袋運(yùn)輸
產(chǎn)品描述:Mag-Fura-2 AM是一種胞內(nèi)鎂離子指示劑,屬于紫外激發(fā)的比率型探針,與鎂離子結(jié)合的Kd值為1.9mM。與Fura-2類似,Mag-Fura-2的激發(fā)波長歷經(jīng)藍(lán)色遷移從369nm到330nm。Mag-Fura-2 AM具細(xì)胞膜滲透性,只需簡單孵育,即可加載進(jìn)入細(xì)胞。
使用方法:
1.儲存液制備
取一管低溫保存的Mag-Fluo-4 AM,置于室溫回溫至少20min。之后加入高質(zhì)量無水DMSO配制成1~5mM儲存液,比如50μgMag-Fluo-4 AM(Mw:817.65 g/mol)溶于12μl DMSO,充分溶解后,即得到5mM儲存液。
【注意】未使用的儲存液分裝儲存在-20℃,避免反復(fù)凍融,且要避光保存。盡快使用完。
2.操作步驟
【注意】以下使用方法僅作參考,需根據(jù)具體的細(xì)胞類型和實(shí)驗(yàn)要求做出調(diào)整。加載溫度范圍是RT~37℃,更高溫度會(huì)提高加載速度,但更低溫度能最小化染料的內(nèi)在化現(xiàn)象。表面活性劑Pluronic®F-127有時(shí)加入能促進(jìn)AM探針在水溶性緩沖液內(nèi)的均勻分散。
2.1 在所需溫度(25℃~37℃)預(yù)孵育細(xì)胞10min,使其離子梯度達(dá)到穩(wěn)定和平衡。
2.2 取4μl Mag-Fluo-4 AM儲存液和5μl 20% Pluronic®F-127,加入1ml細(xì)胞培養(yǎng)液,劇烈漩渦混勻得到均勻的探針分散液。
2.3 取250μl上述制備的探針分散液加入750μl含細(xì)胞的培養(yǎng)基內(nèi),混勻,此時(shí)得到終濃度為1~5μM的工作液,根據(jù)起始母液濃度來確定。
2.4 根據(jù)需求探針孵育15~60min。
2.5 細(xì)胞清洗3次,之后繼續(xù)孵育30min以保證細(xì)胞內(nèi)的探針*去酯化。之后選擇合適的儀器,進(jìn)行熒光測定。
供應(yīng)商:陜西新研博美生物科技有限公司
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