FluoresceinBiotin是一種放射性生物素的替代品，它可以通過(guò)熒光或吸光度來(lái)檢測(cè)和量化生物素結(jié)合Chemicalbook位點(diǎn)；一經(jīng)與抗生物素蛋白(avidin)或鏈霉親和素(streptavidin)結(jié)合，熒光或吸光度就淬滅。

5-FITC Biotin,CAS:134759-22-1 物理性質(zhì)：

英文名：5-FITC Biotin

英文名稱：Fluorescein biotin [5-((N-(5-(N-(6-(biotinoyl)amino)hexanoyl)amino)pentyl)thioureidyl)fluorescein]

中文名：

5-FITC-生物素

熒光素-生物素

5-熒光素-生物素

5-熒光生物素

5-異硫氰酸熒光素-生物素

CAS號(hào)：134759-22-1

分子式：C42H50N6O8S2

分子量：831.02

純度：95%

外形：Orange Yellow Solid

熔點(diǎn) >164°C (dec.)

存儲(chǔ)條件：-20℃，陰涼，干燥，通風(fēng)良好的庫(kù)房

包裝規(guī)格：1g、5g、25g等 

注意事項(xiàng)：取用時(shí)一定要干燥，避免頻繁解凍和冷凍。

溶解性：溶于大部分有機(jī)溶劑，溶于水

相關(guān)類別:熒光探針，標(biāo)記，顆粒和染色;熒光染料

產(chǎn)品：可定制

 

相關(guān)介紹：

熒光素標(biāo)記的生物素(FITC-Biotin)操作步驟：

(一)獲得目的基因

1、通過(guò)PCR方法:以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板,按基因序列設(shè)計(jì)一對(duì)引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點(diǎn)),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。

2、通過(guò)RT-PCR方法:用TRIzol法從細(xì)胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA***鏈,以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進(jìn)行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。

(二)構(gòu)建重組表達(dá)載體

1、熒光素標(biāo)記的生物素(FITC-Biotin)載體酶切:將表達(dá)質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶(同引物的酶切位點(diǎn))進(jìn)行雙酶切,酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。

2、PCR產(chǎn)物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。

(三)  獲得含重組表達(dá)質(zhì)粒的表達(dá)菌種

1、 將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,根據(jù)重組載體的標(biāo)志(抗Amp或藍(lán)白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質(zhì)粒,雙酶切初步鑒定。

2、 測(cè)序驗(yàn)證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進(jìn)入下步操作。否則應(yīng)篩選更多克隆,重復(fù)亞克隆或亞克隆至不同酶切位點(diǎn)。

3、 以此重組質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化表達(dá)宿主菌的感受態(tài)細(xì)胞。

(四)誘導(dǎo)表達(dá)

1、 熒光素標(biāo)記的生物素(FITC-Biotin)挑取含重組質(zhì)粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過(guò)夜培養(yǎng)。

2、按1∶50比例稀釋過(guò)夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養(yǎng)基的300ml培養(yǎng)瓶中, 37℃震蕩培養(yǎng)至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。

3、取部分液體作為未誘導(dǎo)的對(duì)照組,余下的加入IPTG誘導(dǎo)劑至終濃度0.4mM作為實(shí)驗(yàn)組,兩組繼續(xù)37℃震蕩培養(yǎng)3hr。

4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。

5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。

 

相關(guān)系列產(chǎn)品：

1.1339202-33-3，Diazo Biotin-PEG3-azide

重氮生物素-PEG3-疊氮

2.Diazo Biotin-PEG3-DBCO

重氮化合物修飾生物素-三聚乙二醇-二苯并環(huán)辛炔

3.1192802-98-4，UV Cleavable Biotin-PEG2-Azide

紫外可分解生物素-二乙二醇-疊氮

4.773888-45-2，Biotin alkyne

生物素炔烴

5. 908007-17-0，Biotin-azide

N-(3-疊氮丙基)生物素胺

6.1620523-64-9，Biotin-SS-azide

疊氮化物-SS-生物素

7.1260586-88-6，Biotin-C5-Azide

生物素-C5-疊氮

8.122567-66-2，DSPE-Biotin

DSPE-生物素

9.153162-70-0，N-Boc-6-Biotinamidohexylamine

N-生物素-N&＃39;-Boc-1,6-己二胺

10.1797415-74-7，TAMRA-Azide-PEG-Biotin

TAMRA-疊氮化物-PEG-生物素

11.947750-21-2，生物素-C6-胺.TFA

生物素-C6-胺.TFA

12.N/A，Desthiobiotin-PNB ester

脫硫生物素-PNB酯

13.N/A，Desthiobiotin-PEG4-Acid

脫硫生物素-PEG4-酸

14.533-48-2，Dethiobiotin

D-脫硫生物素

15.80750-24-9，Desthiobiotin NHS Ester

脫硫生物素 N-羥基琥珀酰亞胺酯

16.N/A，D-Desthiobiotin Amine

D-脫硫生物素胺

17.2306109-91-9，Desthiobiotin-PEG4-Amine

胺-PEG4-脫硫生物素

18.1802907-99-8，Desthiobiotin-PEG4-Alkyne

脫硫生物素-PEG4-炔烴

【溫馨提示】：供應(yīng)的5-FITC Biotin用于科研，不能用于人體

 

供應(yīng)商：陜西新研博美生物科技有限公司

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