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elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)繪制校準(zhǔn)曲線的方法

閱讀:6800          發(fā)布時(shí)間:2020-1-6

elisa試劑盒校準(zhǔn)曲線的繪制: 用一系列被測(cè)物標(biāo)準(zhǔn)溶液,按照標(biāo)準(zhǔn)方法規(guī)定的步驟,將被測(cè)物轉(zhuǎn)變?yōu)橛猩芤?。制備好的?biāo)準(zhǔn)系列和空白,在方法選定的波長(zhǎng)下,測(cè)定吸光度。已被測(cè)物濃度為橫坐標(biāo),吸光度為縱坐標(biāo),繪制校準(zhǔn)曲線。1)對(duì)標(biāo)準(zhǔn)系列,溶液以純?nèi)軇閰⒈冗M(jìn)行測(cè)量后,應(yīng)先作空白校正,然后繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線;2)標(biāo)準(zhǔn)溶液一般可直接測(cè)定,但如試樣的預(yù)處理較復(fù)雜致使污染或損失不可忽略時(shí),應(yīng)和試樣同樣處理后再測(cè)定。 3)校準(zhǔn)曲線的斜率常隨環(huán)境溫度、試劑批號(hào)和貯存時(shí)間等實(shí)驗(yàn)條件的改變而變動(dòng)。因此,在測(cè)定試樣的同時(shí),繪制校準(zhǔn)曲線zui為理想,否則應(yīng)在測(cè)定試樣的同時(shí),平行測(cè)定零濃度和中等濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液各兩份,取均值相減后與原校準(zhǔn)曲線上的相應(yīng)點(diǎn)核對(duì),其相對(duì)差值根據(jù)方法精密度不得大于5%~10%,否則應(yīng)重新繪制校準(zhǔn)曲線。

凡應(yīng)用校準(zhǔn)曲線的分析方法,都是在樣品測(cè)得信號(hào)值后,從校準(zhǔn)曲線上查得其含量(或濃度)。因此,繪制準(zhǔn)確的校準(zhǔn)曲線,直接影響到樣品分析結(jié)果的準(zhǔn)確與否。此外,elisa試劑盒校準(zhǔn)曲線也確定了方法的測(cè)定范圍。

 

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