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酶聯(lián)免疫試劑盒是酶免疫測(cè)定技術(shù)中應(yīng)用較廣的技術(shù)。其基本方法是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體 （ 聚苯乙烯微量反應(yīng)板 ） 表面，使酶標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)在固相表面進(jìn)行，用洗滌法將液相中的游離成分洗除。
詳細(xì)介紹
酶聯(lián)免疫試劑盒是酶免疫測(cè)定技術(shù)中應(yīng)用廣的技術(shù)。其基本方法是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體 ( 聚苯乙烯微量反應(yīng)板 ) 表面，使酶標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)在固相表面進(jìn)行，用洗滌法將液相中的游離成分洗除。
酶聯(lián)免疫試劑盒主要有：1）自身免疫檢測(cè)試劑盒，包括ELISA和IFA類診斷試劑；2）細(xì)胞因子ELISA試劑盒，包括人、大鼠、小鼠、兔、狗、羊、猴子、豬、豚鼠、馬類血清、尿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液檢測(cè)試劑盒；3）流式細(xì)胞儀用試劑類，包括CD系列、細(xì)胞因子系列等；4）乳膠手工及上機(jī)試劑，包括透光比濁檢測(cè)試劑；5）內(nèi)分泌檢測(cè)試劑盒，包括微色譜柱類檢測(cè)試劑；6）腫瘤標(biāo)記物檢測(cè)試劑；7）微生物傳染病檢測(cè)試劑，包括性病類及其它傳染病類檢測(cè)試劑；8）實(shí)驗(yàn)室儀器類，包括BTS-330大屏幕半自動(dòng)生化分析儀、MiniNeph微量蛋白散色比濁儀及相關(guān)試劑；9）pcr及相關(guān)試劑；10）肝纖維化檢測(cè)；(11)單克隆抗體；(12)ELISPOT：細(xì)胞因子的全新解決方案；(13)特種蛋白；14）微色譜柱；(15)優(yōu)生優(yōu)育TORCH；16）生化試劑；17）抗體；18）細(xì)胞株；19）其它分子生物學(xué)研究用試劑。
標(biāo)本的采集及保存：
1. 血清：全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過夜后于1000g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000 g離心15分鐘，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：1000g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
樣本處理及要求：
1、血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。
仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。
2、血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。
3、尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4、細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
5、組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
6、標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7、不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。