TE-1(人食管癌細(xì)胞)細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
TE-1(人食管癌細(xì)胞)細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。

TE-1(人食管癌細(xì)胞)

Skp2 peptide  細(xì)胞S相激酶相關(guān)蛋白抗原

SLC4A4(solute carrier family 4:sodium bicarbonate cotransporter NBC1)  碳酸氫鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4-A4

Slc4a7/Nbcn1(solute carrier family 4, sodium bicarbonate cotransporter, member 7)  碳酸氫鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4-A7抗原

Smac/DIABLO(the second mitochondrial activator of caspase)  線粒體促凋亡蛋白抗原

SLC33A1(Acetyl-coenzyme A transportor 1)  乙酰輔酶A轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗原

SLC34A2/NaPi-2b(Solute carrier family 34 member 2)  磷酸鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗原

SMN1(survival of motor neuron 1)  運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元生存蛋白1抗原

phospho-Smad2(p-Ser465)petide  磷酸化Smad2抗原

Smad4(Mothers against decapentaplegic homolog 4)  Smad4抗原

Smad7(Mothers against decapentaplegic homolog 7)  Smad 7(多肽)

phosphor-SMAD(p-Ser425)、phosphor-Mothers against decapentaplegic  磷酸化SMAD(p-Ser425)抗原

SNAP-25 (synaptosomal-associated protein 25)  突觸相關(guān)膜蛋白25抗原

Snail  Snail蛋白抗原

Socs 3 (suppressor of cytokine signaling 3)  細(xì)胞因子信號(hào)傳導(dǎo)抑制蛋白3抗原

SOD1(superoxide-dimutase-1)  超氧化物歧化酶1抗原

SOD2 (superoxide-dimutase-2)  超氧化物歧化酶2抗原

Somatostatin/GRIH  生長(zhǎng)抑素抗原

Sox2  胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白

TSFP1/SP1(transcription factor Sp1)  SP1轉(zhuǎn)錄生長(zhǎng)因子抗原

SPARC (secreted protein acidic and rich in cysteine)  富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白抗原

SRF(Serum response factor)  血清應(yīng)答因子抗原

SREBP-1(Sterol Regulatory Element Binding Protein-1)  固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1抗原

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