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SPE柱有哪些分類,以及使用方法

閱讀:317      發(fā)布時(shí)間:2025-3-15
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一、固相萃?。⊿PE)柱的分類

固相萃取柱的分類主要基于?填料基質(zhì)??作用機(jī)理?兩個(gè)維度,具體如下:

(一)按填料基質(zhì)分類

1?、硅膠基質(zhì)小柱?

以硅膠為支撐基質(zhì),通過硅-氧-硅鍵連接,適用于極性化合物分離?。

2、聚合物基質(zhì)小柱?

采用高分子聚合物(如聚苯乙烯-二乙烯苯)作為基質(zhì),pH適用范圍廣(全pH值),吸附位點(diǎn)多,應(yīng)用領(lǐng)域更寬泛?。

3?、吸附型小柱?

包括佛羅里硅土、石墨化碳、氧化鋁等,用于特定類型化合物的吸附。

(二)按作用機(jī)理分類

?1、正相固相萃取柱?

*固定相?:極性物質(zhì)(如硅膠、氧化鋁、硅鎂吸附劑)?。

*適用對象?

:極性或中等極性化合物,通過氫鍵、π—π鍵等作用吸附目標(biāo)物?。

2、反相固相萃取柱?

?*固定相?:非極性或弱極性物質(zhì)(如C18、C8、苯基鍵合硅膠)?。?

*適用對象?:中等到非極性化合物,通過范德華力吸附?。

3、離子交換柱?

?*固定相?:帶電荷的樹脂(如磺酸基陽離子交換柱、季銨基陰離子交換柱)?。

*?適用對象?:帶電化合物(如氨基酸、多肽),通過靜電作用吸附?。

4?、螯合作用柱?

*固定相?:含螯合基團(tuán)的填料(如乙二胺型、亞氨乙酸型)。

*適用對象:重金屬離子吸附?。

二、固相萃取柱的使用方法

(一)通用操作流程

1?、活化(預(yù)處理)?

?*反相柱?:先用甲醇或強(qiáng)極性溶劑潤濕,再用去離子水或緩沖液平衡,確保填料充分濕潤?。

*?正相柱?:用樣品所在的有機(jī)溶劑潤濕(如正己烷)?。

*離子交換柱?:用去離子水或低離子強(qiáng)度緩沖液平衡?。

2、上樣?

*將樣品溶液緩慢通過活化后的SPE柱,目標(biāo)物或雜質(zhì)被吸附在填料上?。

3?、淋洗?

*用弱溶劑沖洗,去除弱吸附的干擾物(如用5%甲醇水溶液淋洗反相柱)?。

4、洗脫?

*選擇強(qiáng)溶劑(如甲醇、乙腈)將目標(biāo)物從填料上洗脫并收集?。

(二)不同應(yīng)用場景的差異操作

1、保留目標(biāo)物模式?

*用于富集目標(biāo)物時(shí),淋洗步驟僅去除雜質(zhì),洗脫時(shí)收集目標(biāo)物?。

2、保留雜質(zhì)模式?

*用于去除雜質(zhì)時(shí),目標(biāo)物直接通過SPE柱進(jìn)入收集液,洗脫步驟用于去除吸附的雜質(zhì)(如食品分析中去除色素)?。

(三)注意事項(xiàng)

1、保持填料濕潤:若活化后填料變干,需重新活化?。

2、控制流速:過快會(huì)導(dǎo)致吸附不充分,一般通過真空泵或注射器手動(dòng)調(diào)節(jié)?。

3、洗脫溶劑選擇:需與目標(biāo)物極性匹配,反相柱多用有機(jī)溶劑,正相柱用中等極性溶劑?。





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