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17次人Ⅲ型前膠原C端肽(PⅢCP)ELISA試劑盒是一種用于定量檢測血清、血漿等生物樣本中PⅢCP含量的科研工具,采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)(ELISA)?。以下是關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)說明:
BS-1719人Ⅲ型前膠原C端肽(PⅢCP)ELISA試劑盒
一、試劑盒組成
預(yù)包被酶標(biāo)板?:含捕獲抗體的96孔板(可拆卸)?
標(biāo)準(zhǔn)品?:凍干粉需復(fù)溶,濃度范圍常見78-5000pg/mL?
檢測抗體?:生物素標(biāo)記抗體及HRP標(biāo)記親和素?
顯色系統(tǒng)?:TMB底物(A/B液)及終止液?
濃縮洗滌液?:需30倍稀釋使用?
二、樣本處理
血清?:采血后1000×g離心10分鐘,避免溶血或脂血?
血漿?:EDTA/肝素抗凝,1000×g離心30分鐘?
保存?:分裝后-70℃凍存,避免反復(fù)凍融;解凍需室溫輕緩混勻?
三、操作流程
試劑平衡?:所有組分需室溫(18-25℃)復(fù)溫30分鐘?
加樣?:
標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋(建議7-8個(gè)濃度點(diǎn))?
樣本與標(biāo)準(zhǔn)品同步加入微孔板,100μL/孔?
孵育?:37℃溫育1小時(shí),嚴(yán)格控時(shí)?
洗滌?:拍干后加洗滌液靜置30秒,重復(fù)5次?
顯色?:
加入TMB底物避光反應(yīng)15分鐘?
終止后立即讀取450nm OD值?
四、注意事項(xiàng)
安全防護(hù)?:避免接觸終止液和底物B(具腐蝕性/光敏感性)?
操作規(guī)范?:
使用無金屬吸頭防止交叉污染?
酶標(biāo)板開封后未用條帶需密封防潮?
質(zhì)量控制?:
批內(nèi)變異系數(shù)(CV)<10%,批間CV<12%?
建議做雙復(fù)孔減少誤差?
五、結(jié)果計(jì)算
以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo)繪制曲線,通過線性回歸方程計(jì)算樣本濃度?。若樣本稀釋,需乘以稀釋倍數(shù)?。
六、應(yīng)用提示
PⅢCP檢測適用于肝纖維化、組織修復(fù)等研究,僅用于科研實(shí)驗(yàn)。建議結(jié)合其他指標(biāo)聯(lián)合分析?。
注:以上資料僅供參考哦,不作為實(shí)際數(shù)據(jù),具體請(qǐng)咨詢技術(shù)老師或品牌供應(yīng)商。
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