用于堿性磷酸酶標(biāo)記分子比色檢測的有 5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸 (BCIP) 和硝基四氮唑藍(lán) (NBT)。BCIP/NBT 底物系統(tǒng)功能多樣，可用于多種應(yīng)用，包括 Northern、Southern 和 Western 印跡、原位雜交和免疫組化。 

BCIP 有兩種鹽形式：溶于水的二鈉鹽和溶于二甲基甲酰胺的對甲苯胺形式。這些鹽形式可用于制備與 NBT 和反應(yīng)緩沖液結(jié)合形成堿性磷酸酶底物溶液的儲備液。該底物系統(tǒng)與堿性磷酸酶共同孵育時(shí)，會產(chǎn)生一種不溶性的 NBT 二甲苯胺產(chǎn)物，該產(chǎn)物的紫色易于觀察。為方便起見，BCIP 和 NBT 的混合物以易于溶解的片劑形式或即用型液體形式提供。

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