一、鄰位連接適用的最短和最長距離是多少？
所有的Duolink® PLA產(chǎn)品都是被設(shè)計(jì)用于鄰位檢測的。當(dāng)使用二抗方法時(shí)，理論上在兩種靶標(biāo)蛋白（表位）間產(chǎn)生信號的最長距離為40 nm。這些數(shù)據(jù)是基于抗體的平均直徑約為10 nm而計(jì)算出來的。Duolink® PLA理論上可檢測距離在0 nm之內(nèi)的兩個(gè)表位，只要兩種單抗可發(fā)生結(jié)合并且不存在位阻。

二、Duolink® PLA產(chǎn)品或試劑可持續(xù)多久？

1.檢測試劑盒中的所有試劑必須總是被保存在-20 °C。這一點(diǎn)對于連接酶和聚合酶尤為重要，它們?nèi)绻荒贸霰浜笮枰槐４嬖陬A(yù)冷的冷凍模塊中（冷凍模塊可保持酶處在-20 °C；而冰浴并不能實(shí)現(xiàn)這一點(diǎn)）。Duolink® PLA探針、抗體稀釋液、封閉液以及封片液必須被保存在+4 °C。不要將PLA探針或由Probemaker生成的探針進(jìn)行冷凍。

2.只要保存在-20 °C，我們可在您收到Duolink® PLA Probemaker后提供6個(gè)月的保障。一旦發(fā)生偶聯(lián)后，我們的經(jīng)驗(yàn)是絕大多數(shù)抗體在+4 °C的有效期為三至六個(gè)月。這種情況下，它將非常依賴于抗體是否需要特殊的保護(hù)劑。

三、是否可以將Duolink® PLA用于活細(xì)胞或非固定的組織樣品？

1.Duolink® PLA一直是針對固定細(xì)胞和組織而優(yōu)化的。

2.通透化對于抗體和探針找尋到其靶標(biāo)是必需的。

3.此外，一些Duolink® PLA試劑（酶、DNA寡核苷酸）可能會(huì)被活細(xì)胞中活性機(jī)制所摧毀。

四、是否可以將PLA探針與傳統(tǒng)的免疫熒光結(jié)合使用？

是的。  只要所有的抗體來自不同的物種并且熒光檢測系統(tǒng)使用的是不同顏色的熒光，就可以將Duolink® PLA探針與傳統(tǒng)的免疫熒光技術(shù)結(jié)合使用。