小體積分光光度計(jì),如 DeNovix DS-11 系列和 DS-8X 八通道分光光度計(jì),能夠使用小至 0.5 (DS-11) 至 1 μL (DS-8X) 的體積進(jìn)行定量測(cè)量。為了進(jìn)行測(cè)量,目標(biāo)樣品在上下采樣表面之間形成一個(gè)液橋。結(jié)果的精度取決于兩個(gè)測(cè)量表面之間校準(zhǔn)距離的精度。本簡(jiǎn)報(bào)將解釋 DeNovix SmartPath™ 技術(shù)如何確保測(cè)量距離(光程)保持在規(guī)格范圍內(nèi),從而獲得準(zhǔn)確、可重現(xiàn)的結(jié)果。
DS 系列軟件在計(jì)算樣品濃度時(shí)使用 Beer-Lambert 方程。該方程將吸光度與光穿過(guò)樣品的濃度和光程相關(guān)聯(lián)。它通常寫成:
A = εbc
A:吸光度值
ε:吸收系數(shù),單位為 L /mol*cm
B:以 cm 表示的樣品光程
c: 溶液中樣品的濃度,以 mol/L 表示
較高濃度的樣品需要較短的光程。微量模式使用實(shí)時(shí)吸光度數(shù)據(jù)來(lái)確定每個(gè)樣品的最佳光程。軟件將根據(jù)需要自動(dòng)將機(jī)械臂向下移動(dòng),以確保使用最佳光程進(jìn)行測(cè)量。
例如,DS-11 系列微量模式使用的光程范圍為 0.5 mm 至 0.02 mm。
SmartPath 技術(shù)使用光機(jī)械組件和專有算法。它們共同提供精確的光程控制。
該技術(shù)使用細(xì)間距、高精度光學(xué)調(diào)節(jié)螺釘、高電機(jī)齒輪比和高分辨率控制將光程調(diào)整到 1 微米以內(nèi)。這可換算成 500 微米時(shí)為 +/- 0.2%,超短光程時(shí)為 +/- 3%。
DS-11 和 DS-8X 儀器使用參考位置,該參考位置在校準(zhǔn)期間由我們工廠設(shè)置。每次啟動(dòng)任何測(cè)量應(yīng)用程序時(shí),都會(huì)知道相對(duì)于參考位置的確切電機(jī)位置。然后使用計(jì)算來(lái)確定移動(dòng)到所需光程所需的電機(jī)旋轉(zhuǎn)次數(shù)。由于旋轉(zhuǎn)到光程的關(guān)系已得到很好的表征,因此很容易實(shí)現(xiàn)較短的光程。
在典型使用過(guò)程中,儀器使用專有軟件算法監(jiān)測(cè)光程精度,并根據(jù)需要進(jìn)行必要的調(diào)整。
DeNovix DS-11 和 DS-8X 與 SmartPath 技術(shù)相結(jié)合,可提供精確的光程控制。
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