白油紫外吸光度測(cè)定法
1范圍
1.1本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了白油紫外吸光度的測(cè)定方法。
1.2本標(biāo)準(zhǔn)適用于化妝、醫(yī)用及食品級(jí)白油。不適用于含有可溶于二甲基亞碉并能顯示熒光或熒光消 光性類添加劑的白油。
1.3本標(biāo)準(zhǔn)采用國(guó)際單位制(SD,用目表示的數(shù)值僅供參考。
1.4本標(biāo)準(zhǔn)并無意對(duì)與使用有關(guān)的所有安全問題都提出建議，因此，在使用本標(biāo)準(zhǔn)之前，使用本標(biāo)準(zhǔn)的 人有貢任調(diào)查和建立適宜的安全和保健操作法,并確定規(guī)章限制的可應(yīng)用性,對(duì)于專門的預(yù)防說明見 7.1-7.2.
2規(guī)范性引用文件
ASTM E 131與分子光諧學(xué)有關(guān)的術(shù)語定義
3術(shù)語和定義
3. 1對(duì)于與吸收光譜有關(guān)的術(shù)語的定義和符號(hào)參見術(shù)語ASTM E 131,本方法用到的特別意義的術(shù)語 如下：
3.1.1
注射能 radiant energy
像電磁波一樣傳遞的能St.
3.1.2
羯射功率 P radiant power
一束輻射能中傳輸能址的比率.
3.2本標(biāo)準(zhǔn)具體的術(shù)語定義如下：
3.2.1
吸光度 A absorbance
對(duì)透射比T的倒數(shù)取以10為底的對(duì)數(shù)，用符號(hào)表示：
A = logl0(l/T) =? log10T (1 )
式中：
T——透射比(3. 2.5).
3.2.2
吸光系數(shù) a absorptivity
吸光度除以樣品光程長(zhǎng)度和濃度的乘積，用符號(hào)表示：
a = A/bc (2 )
式中：
A—吸光度(3. 2.1)；
b——樣品光程長(zhǎng)度(3. 2.4)；
c——濃度（3. 2. 3）。
3. 2.3
濃度 c concentration
用競(jìng)每升表示的樣品量。
3.2.4
樣品光程長(zhǎng)度b sample pathlength
在輜射能光束傳播方向上，測(cè)得的從輻射能進(jìn)入的樣品表面到輻射能穿出的表面的距離，以cm 表示.
3. 2.5
透射比 T transmittance
透過裝在吸收池中試樣萃取液的輻射功率與透過裝在吸收池中參比溶劑的輻射功率之比率. 記為：
T = P./Pt（3）
式中：
P.——透過試樣萃取液的輻射功率；
R—透過參比溶劑的輻射功率。
4方法概要
用二甲基亞破萃取試樣，并在260 nm?420 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)測(cè)定萃取物的紫外吸光度。
5意義和用途
5.1該方法用于確定白油在食品、醫(yī)藥以及化妝品上應(yīng)用的可能性.
5.2食品級(jí)白油、化妝用白油、食品機(jī)械專用白油和中國(guó)藥典（二部）中液狀石蠟等產(chǎn)品規(guī)格中都要求 測(cè)定紫外吸光度。
6儀器
6.1分光光度計(jì)：配1 cm光程液體試樣吸收池架；在290 nm附近的波長(zhǎng)范圍內(nèi)，采用額定譜帶寬度 1 nm或更窄的譜帶,所測(cè)定的吸光度平均值在0.4左右時(shí)儀器的重復(fù)性應(yīng)為±1.0%。
6.2煙融石英吸收池：兩個(gè)，光程長(zhǎng)1.00 cm土0.005 cm.用cm表示的此距離不包括盛裝樣品的吸收 池本身的厚度•
6.3分液漏斗門25 mL,梨形.帶玻璃塞,配聚四氟乙烯旋塞或其他適當(dāng)?shù)牟晃廴臼褂萌軇┑男?，?證分液漏斗不漏液。
7試劑
6.41正己烷：分析純，用1 cm吸收池，以蒸圜水作參比，在波長(zhǎng)260 nm以上進(jìn)行測(cè)量時(shí)，紫外吸光度不 超過0.02（警告：正己烷極易燃燒，吸入時(shí)對(duì)人體有害，可能造成神經(jīng)細(xì)胞損傷）。溶劑純度應(yīng)符合下列 要求：在260 nm?420 nm范圍的任一波長(zhǎng)上,8. 3條所規(guī)定的“參比溶液"用蒸埔水作參比的吸光度曲 線不顯示外來雜質(zhì)峰，且吸光度不超過用蒸懈水作參比的二甲基亞碘的吸光度.
注：如果達(dá)不到要求，用下述方法精制：采用長(zhǎng)1 m,直徑5 cm的吸附柱.填裝0.149 mm?0. 074 mmdOO目?200 目）徑活化（150℃，3h）的細(xì)孔層析硅膠至吸附柱高的四分之三處，通?？删普和? L?4 Ls
7.2二甲基亞荻：作光譜溶劑（見注）（警告：二甲基亞硯可燃.皮膚吸收較快），清澈.水白色，含餓
99.9%,熔點(diǎn)18. 5C•采用1 cm吸收池，以蒸溜水作參比的吸光度曲線在264 nm處不超過1.0,且在
420 nm以下波長(zhǎng)范圍內(nèi)無外來雜質(zhì)峰.
注?當(dāng)二甲基亞碾達(dá)不到上述要求時(shí)，可以通過澹謔的方法提純，將其通過填裝粒度L68 mmX0.420 mm(12目X 40日)活性炭的吸附柱迸行漂源，吸附柱長(zhǎng)1.2 m,直徑25 mm,底部拉成直徑6.4 mm的筋喟.柱H帶有裝液體 的貯液器。將玻璃毛放在吸附柱底，在玻璃毛上鋪一層13 mm厚的粒度0.707 mm-O. 074 mm(25 R-200 目)或粒度0.149 mm?0.074 mm(100 R-200目)的硅皎,而后用活性炭填裝吸附柱,將二甲基亞確倒人吸附 柱頂?shù)娜萜鲀?nèi)，在大氣壓下通過活性炭迸行滲泡,提純的二甲基亞隊(duì)在吸附柱底部收集.由于二甲■?業(yè)砸在空 氣中極易吸潮并能與某些金屬容器發(fā)生化學(xué)反應(yīng)•所以應(yīng)存放在玻璃塞瓶中.
7.3蒸爆水：一次蒸宿水或凈化蒸僮水。
8操作步景
8. 1取25 mL試樣和25 mL正己烷置于分液漏斗中混合，加入5. 0 mL二甲基亞奧，劇烈振蕩混合液 至少1 min,使之充分混合，靜置至下層溶液透明。
注：如果室溫較低，二甲基亞碉易結(jié)晶而使下層溶液渾濁.因此，實(shí)版過程中室溫應(yīng)不低于20P.
8.2將透明的下層溶液放入另一分液漏斗中，加2 mL正己烷，劇烈振蕩，靜置至下層溶液透明。將下 層溶液放入】cm吸收池中•標(biāo)為“試樣萃取液".
8.3取25 mL正己烷置于分液漏斗中，加入5.0 mL二甲基亞網(wǎng)，劇烈振蕩混合液至少1 min,靜世至 下層溶液透明，將下層溶液放入另一個(gè)1 cm吸收池中，標(biāo)為“參比溶液。
8.4在260 nm?420 nm波K范圍內(nèi)，用“參比溶液"作參比，測(cè)定“試樣萃取液"的吸光度.
注'"試樣萃取液"和“參比溶液"在程度有差異時(shí)對(duì)吸光度的測(cè)定影晌較大，測(cè)定時(shí)•應(yīng)保證"試樣萃取液"和“參比 溶液''溫度相同.
8.5對(duì)含有抑制劑的樣品按附錄B進(jìn)行校正.
9報(bào)告
報(bào)告在規(guī)定波長(zhǎng)下的白油紫外吸光度,精確至小數(shù)點(diǎn)后3位.
10精密度和偏差
10.1精債度
10. 1. 1重復(fù)性：同一操作者，用同一臺(tái)儀器.在規(guī)定的條件下，正常而正確地操作，對(duì)同一武樣測(cè)得的 連續(xù)成靜結(jié)果之差，從長(zhǎng)期看，在20次中僅有一次超過0.014吸光度單位。
10.1.2再現(xiàn)性：不同操作者于不同實(shí)驗(yàn)室•在規(guī)定的條件下，正常而正確地操作,對(duì)同一試樣測(cè)得的兩 個(gè)單獨(dú)的試驗(yàn)結(jié)果之差，從氏期著，在20次中僅有一次超過0.044吸光度單位.
10.1. 3這些吸光度的精密度數(shù)據(jù)是在275 nm?280 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)獲得的.
10.2偏差
本操作步驟無偏差，因?yàn)閮H從一個(gè)試臉方法角度，吸光度值可以被限定。
附錄A
（資料性附錄）
本標(biāo)準(zhǔn)與ASTM D 2269J999的技術(shù)性差異及其原因
表A. 1給出了本標(biāo)準(zhǔn)與ASTM D2269-9996用紫外吸收評(píng)定白色礦物油的泅定方法》的技術(shù)性 差異及其原因的一覽表.
裹A. 1本標(biāo)準(zhǔn)與ASTM D 2269:1999的技術(shù)性差異及其原因
本標(biāo)準(zhǔn)的章條編號(hào) | 技術(shù)性差異 | 原 因 |
1.1 | 將 ASTM D 2269，1999 中 1.】“NF 和 USP 白色礦物油"改為“白油" | 適合我國(guó)國(guó)情和標(biāo)準(zhǔn)版式 |
2 | 引用了我國(guó)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn) | 以適合我國(guó)國(guó)情 |
4 | 刪除ASTM D 2269J999中“格吸光度與孩 標(biāo)準(zhǔn)溶液對(duì)比" | 本方法主要用于檢驗(yàn)白油吸光度而 不評(píng)定其等級(jí) |
6. 1 | 刪除注1：檢測(cè)分光光度計(jì)推薦方法見 ASTM E275 | 分光光度計(jì)符合JB/T 6778要求并定期檢定 |
7 | IN除 ASTM D 2269：1999 中 7. 1. 2.7. 2?7.5 | 本方法主要用于檢翼臼油吸光度而 非評(píng)定其等級(jí),不靂要與評(píng)定有關(guān)的玳刑 材料 |
7.1 | 增加正巳烷的精制方法 | 進(jìn)行細(xì)化,便于操作 |
8. 1 | 增加“室溫應(yīng)不低于201"要求 | 增加可操作性 |
8.4 | 增加試樣萃取液和參比溶液同溫要求 | 增加可操作性，減小實(shí)驗(yàn)誤差 |
9 | 增加“報(bào)告至小數(shù)點(diǎn)后3位" | 增加可操作性 |
全文 | 將澧定波長(zhǎng)由260 nm?350 nm改為260 nm?420 nm | 擴(kuò)大測(cè)定范圉，要求更嚴(yán)格 |
附錄B
（資料性附錄）
抑制劑含量的校正
B . 1 如果在某試樣中含有足．的同一抑制荊并且有這種含抑制劑的試樣可以用來配制一個(gè)調(diào)合物，則含抑制劑可能造成的吸光度校正可按下述方法進(jìn)行，加人到含抑制荊試樣單的外加抑制劑的濃度應(yīng)等于含抑制劑試樣本身抑制荊的濃度。 B . 2 稱取至少 50 mg 抑側(cè)劑，里于容盆瓶中，用含抑制洲的試樣稀釋至刻度，混合均勻．如果裕要，可用含抑制荊的白油進(jìn)一步稀釋，以得到所要求的添加抑制荊的濃度。
B . 3 按照本方法操作原始含抑制劑的白油原試樣，并將其標(biāo)為試樣 A 。
B . 4 按照本方法操作含已知添加抑制劑 t 的調(diào)合物，并將其標(biāo)為試樣 B 。
B . 5 在相應(yīng)波長(zhǎng)處試樣 B 和試樣 A 間的吸光度差值倉(cāng) △A 按下式計(jì)算：
△A=Ab-Aa • • • • • • • • • •• • • •• • • •• • • • •• • • •• • • • • • •• • • •• • • • • • •（ B .1）
式中：
△A ― 給定波長(zhǎng)處的吸光度差值；
A 。 ― 在同一波長(zhǎng)處試樣 B 的吸光度；
A 。 ― 在同一波長(zhǎng)處試樣 A 的吸光度。
每一波長(zhǎng)的吸光度校正按下式計(jì)算：
Ac= Aa-△A• • • • • • • • • • •• • • •• •• •• • •• • • • • • • • • • • • • • • • • （ B . 2 )
式中：
A c——在每一波長(zhǎng)處的校正吸光度。
B . 6 在試樣譜圖上波長(zhǎng)低于或離于那些有增 t 的波長(zhǎng)處標(biāo)上拐點(diǎn)。
B . 6 . 1 畫一條基線正切于連接這兩點(diǎn)的曲線。
二 6 . 2 沿基線讀取每一個(gè)波長(zhǎng)位里的吸光度 Ad 。
B . 7 在每一個(gè)波長(zhǎng)位置對(duì)比 A d和 A c ，如果 A c小于 A d，則表明原始試樣中抑制劑含 t 小于所加的量。
B . 8 在 260 nm ~420 nm 波長(zhǎng)范圍內(nèi)（包括 260 nm 和 420 nm ）用吸光度 A c或 A d（無論哪個(gè)較大）與參比溶荊作對(duì)比。
