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福建凈化車間工程銀江實驗室裝修規(guī)劃設(shè)計

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  • 品牌 其他品牌
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
  • 所在地 廣州市
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更新時間:2021-08-02 16:19:46瀏覽次數(shù):518

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產(chǎn)品實拍:

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1、建立樣品準(zhǔn)備區(qū)

2、樣品準(zhǔn)備和RNA-PCR RNA-PCR的額外步驟需要額外的樣品操作,這樣增加了樣品之間污染的機會。為了避免這一問題,反轉(zhuǎn)錄一步可以在樣品準(zhǔn)備區(qū)進(jìn)行。在RNA-PCR中應(yīng)用UNG以防止污染的方法也有報道。

該去專門用于準(zhǔn)備各種反應(yīng),這個區(qū)域必須保持干凈,而且沒有來自克隆和樣品準(zhǔn)備的污染。前PCR區(qū)必須要有試劑和準(zhǔn)備,特別是專門用于前PCR區(qū)的正壓活塞式移液管。

⑴所用的所有溶液都應(yīng)該沒有核酸和(或)核酸酶(DNase和RNase)污染。⑵所有PCR試劑中使用的水都應(yīng)該是高質(zhì)量的-新鮮蒸餾的去離子水,用0.22μm過濾的,并且是高壓。⑶在20℃到25℃貯存的試劑建議加點像疊氮鈉一類的抗微生物劑,在擴增試劑或樣品制備試劑中加入0.025%的疊氮鈉不擴增反應(yīng)。⑷所用試劑都應(yīng)該以大體積配制,實驗一下看試劑是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量進(jìn)行貯存。⑸所有試劑和樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性的瓶子和管子。⑹新配制的試劑在用于準(zhǔn)備新的標(biāo)本之前應(yīng)該加以檢驗。⑺樣品準(zhǔn)備和前PCR區(qū)所使用的移液管在不使用時都應(yīng)該小心保存。

⑴可以把即刻可用的“主混合物"溶液配好、分裝并保存在-20℃或4℃,在實驗室只涉及到擴增一種或少數(shù)幾種特異序列時這樣做很有用。⑵如果你的實驗室使用多套引物,以致于配制包括所有試劑的單一反應(yīng)混合物不夠經(jīng)濟,可以考慮分裝保存夠一天的PCR成分。⑶作為一個規(guī)則,應(yīng)該保存一套陰性、弱陽性和強陽性對照樣品來分析樣品配制和PCR前過程的效率和潔凈程度。而且,你也希望通過使用一個已知的弱陽性樣品來驗證你的樣品緩沖液以證明里面不含擴增物。⑷陰性樣品要與每組樣品同時做,以分析是否存在樣品與樣品之間的污染以及是否存在PCR產(chǎn)物的污染,陰性對照應(yīng)該包括核酸以外的所有試劑。⑸當(dāng)做陽性對照時,有兩個理由決定了應(yīng)該使用***少數(shù)量的核酸。⑹由于必須有對照反應(yīng),對照模板的特點應(yīng)該予以考慮。

已設(shè)計出很有力的酶學(xué)方法用來消除一種形式的污染—使用UNG,這一技術(shù)能有效地消除由PCR產(chǎn)物引起的污染。另一種控制污染的方法是使用紫外線,這種方法不能*消除污染問題,但可以將污染降低幾個數(shù)量級。

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