非洲豬瘟檢測(cè)PCR實(shí)驗(yàn)室建設(shè)@競(jìng)道了解JD-PCR16Construction of PCR Laboratory for detection of African classical swine fever

　　非洲豬瘟疫情發(fā)生兩年多以來(lái)，養(yǎng)殖從業(yè)人員對(duì)于非洲豬瘟疫情的認(rèn)識(shí)從最初的漠不關(guān)心，到談非色變，如今多數(shù)豬場(chǎng)已經(jīng)找到了防控非洲豬瘟的辦法，發(fā)現(xiàn)非洲豬瘟可防可控，并不可怕。目前，養(yǎng)豬業(yè)通過(guò)精準(zhǔn)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)病原，同時(shí)有效執(zhí)行生物安全措施使得非洲豬瘟防控取得了可喜的進(jìn)展，可有效遏制疫情發(fā)生和蔓延。

　　非洲豬瘟在我國(guó)暴發(fā)之初，養(yǎng)殖從業(yè)人員對(duì)于生物安全管理存在畏難心理，對(duì)非洲豬瘟病毒了解不夠，普遍認(rèn)為生物安全太難，無(wú)法有效執(zhí)行。發(fā)生非洲豬瘟后，精準(zhǔn)清除執(zhí)行不到位，以至于幾乎全軍覆沒(méi)，損失慘重。從今年很多豬場(chǎng)的經(jīng)驗(yàn)來(lái)看，生物安全真正落實(shí)到位是可行且行之有效的。另外，選擇敏感、穩(wěn)定、性能優(yōu)異的檢測(cè)方法，結(jié)合有效的阻斷措施后，精準(zhǔn)清除的成功率非常高。

　　非洲豬瘟診斷目前*、使用最多的方法是熒光定量PCR檢測(cè)。熒光定量PCR檢測(cè)系統(tǒng)由熒光定量PCR儀、熒光定量PCR檢測(cè)試劑和耗材、核酸提取儀、核酸提取試劑和耗材等組成。設(shè)備、試劑和耗材選擇和搭配不當(dāng)，可能導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確。

　　熒光定量PCR是一種非常敏感的檢測(cè)方法。實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常開(kāi)展檢測(cè)工作，一旦實(shí)驗(yàn)室管理和環(huán)境控制沒(méi)有執(zhí)行到位，就存在由于交叉污染出導(dǎo)致假陽(yáng)性的風(fēng)險(xiǎn)，進(jìn)而帶來(lái)臨床上誤殺豬只的嚴(yán)重后果

　　非洲豬瘟野毒感染時(shí)血液和組織中病毒載量非常高，經(jīng)常檢測(cè)到Ct值15左右的樣本。樣本處理和提取的過(guò)程中需要進(jìn)行離心操作，這些高濃度的樣本離心時(shí)容易造成氣溶膠污染。對(duì)于血液和組織樣本，檢測(cè)非洲豬瘟病毒應(yīng)該盡可能減少離心操作，這類樣本病毒載量高、樣本較純凈，可以采用免提取檢測(cè)。

　　實(shí)驗(yàn)室如果長(zhǎng)期檢測(cè)陽(yáng)性樣本，擴(kuò)增產(chǎn)物中高濃度的目的片段很容易擴(kuò)散到空氣中并不斷累積導(dǎo)致氣溶膠污染。

　　核酸自動(dòng)提取儀可顯著提高實(shí)驗(yàn)效率，然而，養(yǎng)殖企業(yè)實(shí)驗(yàn)室大多使用中小型核酸自動(dòng)提取儀，并且沒(méi)有適當(dāng)?shù)姆牢廴敬胧跇颖咎幚磉^(guò)程中可能出現(xiàn)交叉污染。相對(duì)于氣溶膠污染，樣本處理過(guò)程中交叉污染導(dǎo)致的假陽(yáng)性概率較小。

　　儀器特點(diǎn)

　　1.體積小，重量輕，易于攜帶。輕松滿足外出實(shí)驗(yàn)的需求。

　　2.內(nèi)置10寸高清電容屏PDA，觸屏操作，簡(jiǎn)便快捷。

　　3.Marlow高品質(zhì)Peltier制冷片，結(jié)合德國(guó)gdPT1000溫度傳感器以及電性電阻加熱補(bǔ)償邊緣的溫度控制模式，最大升溫速度7℃，最大降溫速度5℃，大大縮短實(shí)驗(yàn)時(shí)間。

　　4.整板3s快速采光模式，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果孔位一致性。

　　5.簡(jiǎn)潔直觀的軟件引導(dǎo)，輕松開(kāi)啟檢測(cè)實(shí)驗(yàn)。

　　三、非洲豬瘟PCR檢測(cè)儀應(yīng)用領(lǐng)域

　　□ 基礎(chǔ)科學(xué)研究

　　□ 病原體檢測(cè)

　　□ 肉制品摻假

　　□ 轉(zhuǎn)基因檢測(cè)

　　□ 食品安全檢測(cè)

　　□ 藥物開(kāi)發(fā)及合理用藥

　　□ 基因表達(dá)

　　□ 水體監(jiān)測(cè)