高效液相法對(duì)茶葉中茶多酚和兒茶素類的含量測(cè)定
中國(guó)是茶文化的發(fā)源地,茶葉作為中華傳統(tǒng)文化中的一種飲品原料,在中國(guó)有漫長(zhǎng)的發(fā)展歷史。時(shí)至今日,茶湯在全中國(guó)仍然有廣泛的受眾群體,很多人在日常生活中以攝入茶湯為主要的水分?jǐn)z入方式。一直以來(lái),茶葉憑借其*的活性成分和對(duì)癌癥及相關(guān)疾病的預(yù)防功能,在降低我國(guó)潛在高危群體疾病的產(chǎn)生概率中發(fā)揮作用。
據(jù)研究:茶葉中主要有茶多酚、生物堿、脂多糖、氨基酸、蛋白質(zhì)和礦物質(zhì)成分等,具有普遍的藥理學(xué)活性。茶多酚(tea polyphe- nol,TP) 是茶葉中 30 多種酚類及其衍生物的總稱,化學(xué)組成包括黃烷醇類、羥類-4-黃烷醇類、黃酮醇類、黃酮類、花色苷類、酚酸類等化合物。兒茶素,英文名為Catechin,又名兒茶酸、兒茶精(Caredhieacid),系從茶葉等天然植物中提取出來(lái)的一類酚類活性物質(zhì)。茶葉中含有多種生物堿:茶堿、可可堿、大部分茶葉中CAF 是主要生物堿成分。
依據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T8313-2018《茶葉中茶多酚和兒茶素類含量檢測(cè)方法》對(duì)樣品進(jìn)行前處理和檢測(cè)使用外標(biāo)法定性分析。
前處理:均勻磨碎的茶葉磨碎試樣于10ml離心管中,加入在70℃中預(yù)熱過(guò)的70%甲醇水溶液5ml,用玻璃棒充分?jǐn)嚢杈鶆驖駶?rùn),立即移入70℃水浴中,浸提10min(隔5min攪拌一次),浸提后冷卻至室溫,轉(zhuǎn)入離心機(jī)在3500r/min轉(zhuǎn)速下離心10min,將上清液轉(zhuǎn)移至10ml容量瓶。殘?jiān)儆?ml的70%甲醇水溶液提取一次,重復(fù)上述操作。合并提取液定容至10ml,搖勻,0.45μm膜過(guò)濾,待用。
標(biāo)準(zhǔn)溶液:沒(méi)食子酸儲(chǔ)備液、兒茶素儲(chǔ)備液、表兒茶素儲(chǔ)備液、表沒(méi)食子兒茶素儲(chǔ)備液、表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯儲(chǔ)備液、表兒茶素沒(méi)食子酸酯儲(chǔ)備液。
檢測(cè):流動(dòng)相A:分別將90ml乙腈,20ml乙酸,2mlEDTA-2Na溶液加入1000ml容量瓶中,用水定容至刻度,搖勻。
流動(dòng)相B:分別將800ml乙腈,20ml乙酸,2mlEDTA-2Na溶液加入1000ml容量瓶中,用水定容至刻度,搖勻。
色譜條件:C18(粒徑5μm,250mm×4.6mm),1ml/min流速,紫外檢測(cè)波長(zhǎng)為278nm,柱溫35℃,進(jìn)樣量10μL。
梯度條件:0-10min A相100%
10-25min A相:B相(68:32)
參考色譜圖如下:
根據(jù)市場(chǎng)調(diào)研,北京北方偉業(yè)計(jì)量技術(shù)研究院推出茶葉中部分對(duì)照品,可用于科研中含量和純度檢測(cè);定性鑒別研究及中藥的鑒別、檢查、質(zhì)量控制和校正檢定儀器性能
茶葉中部分對(duì)照品列表
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 純度/濃度 | 規(guī)格 |
BWC9015-2016 | 沒(méi)食子酸 | ≥98% | 20mg |
BWC9043-2016 | 表沒(méi)食子兒茶素 | ≥98% | 20mg |
BWC9041-2016 | 兒茶素 | ≥98% | 20mg |
BWC9042-2016 | 表兒茶素 | ≥98% | 20mg |
BWC9045-2016 | 表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯 | ≥98% | 20mg |
BWC9044-2016 | 表兒茶素沒(méi)食子酸酯 | ≥98% | 20mg |