bca蛋白定量試劑盒的使用方法

用BCA蛋白定量的方法進行蛋白定量， 是保羅.史密斯團隊在20 世紀年代開創(chuàng)的 。目前已成為蛋白定量的主要實驗方法。BCA蛋白定量法是蛋白定量實驗中常用的測定方法之一，除此之外，還有Bradford法和紫外分光光度計法。 常用的bca蛋白定量試劑盒有碧云天bca蛋白定量,bca蛋白定量試劑盒等。BCA蛋白定量主要分為兩個步驟：

一是在堿性環(huán)境下將蛋白樣本中的二價銅離子轉換為一價銅，也就是將CU離子作為顯色劑，這樣的反應過程也被成為雙縮脲 (NH2-CO-NH-CO-NH2) 反應。

下面進入實驗的第②環(huán)節(jié)，樣本中的蛋白在BCA 與銅離子的參與下進一步完成反應，形成紫紅色的絡合物。此時根據被還原的二價銅離子數估算蛋白質濃度的函數。用分光光度計測試562 nm波段 的吸光度。通過蛋白濃度函數、吸光度等項與BSA 蛋白標準品對比，從而推算出蛋白含量即蛋白定量。

（上圖為： BCA蛋白定量實驗步驟圖）

我們知道在BCA蛋白定量實驗中，蛋白質的肽鏈結構會受主要影響，還有一些螯合劑與還原劑也會影響到實驗的反應過程，比如常見的EDTA,EGTA,DTT, 還有β- 硫 基乙醇等試劑。一般要求β- 硫 基乙醇的濃度不大于 0.001% ； EDTA 濃度低于 10mM ； 二硫蘇糖醇 DTT 試劑的話需要低于 1mM. 試劑中盡量不要使用 EGTA 強螯合劑。實踐證明， BCA蛋白定量試劑盒 中低濃度的鹽酸胍等變性劑和 NP-40 等去污劑不會對BCA法的 蛋白定量有太大影響， 實驗中可以初步忽略其干擾力。

    BCA蛋白定量法是蛋白定量實驗中常用的測定方法之一，除此之外，還有Bradford 法和紫外分光光度計法。蘇州阿爾法生物 13年的生物儀器設備與耗材的行業(yè)經驗，主要供應的實驗室試劑包括干細胞培養(yǎng)、凝膠成像、 pcr 檢測、 ECL 發(fā)光、干細胞培養(yǎng)、 bca蛋白定量試劑盒等相關系列產品 。