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蛋白水平動態(tài)調(diào)控策略的研究中水平振蕩器的應(yīng)用
閱讀：584 發(fā)布時間：2021-7-23
水平振蕩器適用于環(huán)境水樣、土壤樣品和固體廢棄物的振蕩浸提，且符合固體廢棄物浸出毒性浸出設(shè)備-中國環(huán)境保護(hù)標(biāo)準(zhǔn)（HJ577-2009）設(shè)備標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用于環(huán)保、固廢處置等與固體廢物的毒性鑒別、研究、處理、處置的相關(guān)行業(yè)，也適用于藥、化工、教學(xué)等行業(yè)的生產(chǎn)試驗(yàn)和耳穴研究。
在蛋白水平動態(tài)調(diào)控策略的研究與應(yīng)用中，微生物中廣泛存在的別構(gòu)調(diào)節(jié)可用于開發(fā)蛋白水平的調(diào)控策略。別構(gòu)調(diào)節(jié)是指別構(gòu)蛋白將效應(yīng)物與別構(gòu)結(jié)合位點(diǎn)的結(jié)合效應(yīng)傳遞到活性位點(diǎn)，從而對蛋白質(zhì)的活性進(jìn)行調(diào)控的過程。通過結(jié)合效應(yīng)物后的構(gòu)象改變，可以直接調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)活性來動態(tài)調(diào)控代謝通量而不引入過多的代謝負(fù)擔(dān)，具有較大的應(yīng)用潛力。
由于水平振蕩器的應(yīng)用，實(shí)現(xiàn)了前6 h內(nèi)木糖內(nèi)酯酶的有效振蕩表達(dá)，維持了胞內(nèi)pH穩(wěn)定，在5L的發(fā)酵設(shè)備中生產(chǎn)了199.44 g/L的D-木糖酸。Brockman等將SsrA降解標(biāo)簽用于肌醇合成途徑中1-磷酸果糖激酶降解速度的動態(tài)調(diào)控，從而對葡萄糖-6-磷酸進(jìn)入糖酵解途徑和肌醇合成途徑的通量進(jìn)行調(diào)控，通過生長階段與生產(chǎn)階段切換的方式將肌醇的積累量提高了2倍。
水平振蕩器操作步驟：
1、將待振蕩提取的樣品和提取液按要求置于樣品瓶內(nèi)，合上內(nèi)蓋，擰緊外蓋，倒轉(zhuǎn)樣品瓶，保證瓶內(nèi)溶液不滲漏。
2、將水平振蕩器接通電源，按下開關(guān)，開啟儀器電源。
3、確定振蕩時間，調(diào)節(jié)“時間設(shè)定與顯示”按鈕到要求的時間。
4、根據(jù)浸取方法的要求，設(shè)定浸取振蕩的頻率。設(shè)定頻率不超過120次/分。
5、本儀器定時時間到時自動停止工作，若需再次啟動需要先關(guān)閉整機(jī)電源后再重新通電方能工作。