擬南芥R-SNARE蛋白YKT61是雌雄配子體發(fā)生的必需基因
植物雌雄配子體發(fā)生是有性生殖的前提。減數(shù)分裂產(chǎn)生的單核小孢子經(jīng)過兩次有絲分裂,形成帶有兩個精細胞的花粉。減數(shù)分裂產(chǎn)生的功能大孢子經(jīng)過三次有絲分裂,形成七細胞八核的胚囊,其中三個反足細胞進行程序性死亡,兩個中央極核融合,形成帶有一個中央細胞、一個卵細胞、兩個助細胞的成熟胚囊。
雌雄配子體發(fā)生過程伴隨著液泡的動態(tài)變化。液泡酸化及囊泡異常通常影響雌雄配子體發(fā)生,但目前尚未發(fā)現(xiàn)在雌雄配子體發(fā)生過程中均必需的基因。
近日JIPB在線發(fā)表山東農(nóng)業(yè)大學張彥課題組題為“The Arabidopsis R‐SNARE protein YKT61 is essential for gametophyte development“的研究論文。擬南芥YKT61作為R-SNARE,其酵母同源蛋白參與多個囊泡-靶膜的融合過程。由于擬南芥種質(zhì)庫中沒有YKT61的突變體材料,通過基因組編輯技術(shù),研究人員獲得了YKT61的突變體。有趣的是,突變基因*不能通過雌雄配子體傳代,其雜合突變體自交后代均為野生型,表明該基因為首ge雌雄配子體發(fā)生的必需基因。進一步研究表明,ykt61突變體的單核小孢子不能進行第yi次有絲分裂產(chǎn)生二核小孢子,而ykt61突變體的雌配子體在正常發(fā)育至七細胞八核期后,啟動異常的細胞死亡,造成胚囊降解。引入Cas9-resistent YKT61 (crYKT61)能夠*回補ykt61突變體雌雄配子體發(fā)育表型,證明該表型確由YKT61突變導致。此外,研究人員發(fā)現(xiàn)YKT61第八氨基酸殘基缺失,干擾了其與其它SNARE蛋白的互作能力。帶有這種YKT61ΔV8的ykt61突變體,表現(xiàn)為功能缺失突變體,暗示YKT61與其它SNARE的互作對其發(fā)揮功能至關(guān)重要。
ykt61突變體胚囊在成熟前期異常降解
本研究揭示了植物中shou個雌雄配子體發(fā)育的必需基因,為研究此類基因提供了重要參考信息。通過對YKT61蛋白關(guān)鍵位點的功能解析,為深入研究其同源蛋白在真核細胞中的生物學功能提供了線索。
研究生馬婷、李恩博士、及研究生李魯申為本文的共同第yi作者,山東農(nóng)業(yè)大學張彥教授為本文通訊作者。該研究得到了國家自然科學基金的資助。