多層囊泡 (MLV) 的制備

時間：2023/10/24閱讀：607

以下是用于制備脂質(zhì)體的凍干（冷凍干燥）脂質(zhì)混合物的方案的簡要概述：

將脂質(zhì)溶解在氯仿中。
以適當(dāng)?shù)谋壤旌现|(zhì)。
使用干燥氮氣流小心蒸發(fā)有機(jī)溶劑。
將脂質(zhì)混合物重新懸浮在環(huán)己烷中。如果混合物未全部溶解在環(huán)己烷中，則添加少量乙醇（環(huán)己烷體積的 1-2%）。不要使用過多的乙醇，因為過量的乙醇不會使溶液凍結(jié)。
使用干冰冷凍環(huán)己烷溶液。
快速將冷凍混合物置于高真空系統(tǒng)（凍干系統(tǒng)）上。一般來說，“室內(nèi)真空"系統(tǒng)對于這個過程來說不夠強(qiáng)大。樣品應(yīng)保持冷凍狀態(tài)直至全部干燥；如果樣品開始解凍，則可能是真空不夠強(qiáng)，或者存在太多乙醇。解凍的樣品不會產(chǎn)生白色粉末，并且可能會從小瓶中隆起或起泡。
將樣品放在真空系統(tǒng)上 3-5 小時（取決于使用的環(huán)己烷量）或直到樣品全部干燥（從真空中取出時，小瓶摸起來或環(huán)己烷的氣味不應(yīng)感覺冷）。注意：這會產(chǎn)生干燥的白色粉末，很容易懸浮在水中。另一種方法是使用適當(dāng)?shù)乃跃彌_液重新懸浮通過蒸發(fā)氯仿而產(chǎn)生的脂質(zhì)膜。
將脂質(zhì)混合物懸浮在水性緩沖液中（緩沖液溫度應(yīng)高于脂質(zhì)的相變溫度），并讓混合物在脂質(zhì)的相變溫度以上水合 30-60 分鐘（偶爾渦旋）。該過程產(chǎn)生大的多層囊泡（LMV 或 MLV）。對于要包埋的水溶性化合物，遵循相同的方案，不同之處在于將化合物溶解在用于重構(gòu)干脂質(zhì)的水性緩沖液中，并且通過凝膠過濾除去外部化合物（未封裝的）。

參考

Frank Szoka, Jr. 和 Demetrios Papahadjopoulos，(1980)，“脂質(zhì)囊泡（脂質(zhì)體）的比較特性和制備方法"，Ann。生物物理學(xué)牧師。生物工程。，9：467-508。

多層囊泡 (MLV) 的制備

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