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KAPA 超外顯子組

時(shí)間：2024/5/28閱讀：530

高效、均勻的基于雜交的全外顯子組測(cè)序捕獲

新的 KAPA HyperExome 探針池結(jié)合了十多年的探針設(shè)計(jì)經(jīng)驗(yàn)和改進(jìn)的探針制造工藝，能夠高效、均勻地基于雜交捕獲全外顯子組測(cè)序 (WES)。實(shí)現(xiàn)對(duì)基因組變異的靈敏、可靠的檢測(cè)，包括外顯子區(qū)域內(nèi)的單核苷酸變異 (SNV)、插入/缺失、拷貝數(shù)變異 (CNV)、基因融合、倒位和其他重排。

· 通過(guò)好的捕獲均勻性降低檢測(cè)變異所需的測(cè)序量，從而降低測(cè)序成本并節(jié)省時(shí)間

· 可靠地豐富具有挑戰(zhàn)性的、以前無(wú)法接近的外顯子區(qū)域

· 利用 387 個(gè)樣本追蹤 SNP確保準(zhǔn)確識(shí)別樣本

· 使用由 KAPA HyperPrep 或 KAPA HyperPlus Library Prep Kits 驅(qū)動(dòng)的 HyperCap Workflow v3簡(jiǎn)化靶向測(cè)

性能數(shù)據(jù)

降低測(cè)序成本并節(jié)省時(shí)間

· 利用 KAPA HyperExome 緊湊的 ~43 Mb 設(shè)計(jì)優(yōu)化測(cè)序吞吐量

· 與供應(yīng)商 X 相比實(shí)現(xiàn)更好的覆蓋率，尤其是更深層次的排序

與供應(yīng)商 X Exome 相比，KAPA HyperExome 具有更高的目標(biāo)讀取百分比、更深的中值覆蓋率和更廣泛的目標(biāo)覆蓋率。

降低測(cè)序成本并節(jié)省時(shí)間

圖 1.與供應(yīng)商 X Exome 相比，KAPA HyperExome 具有更高的目標(biāo)讀取百分比、更深的中值覆蓋率和更廣泛的目標(biāo)覆蓋率。

對(duì)于 KAPA HyperExome 和供應(yīng)商 X 外顯子組工作流程：對(duì)來(lái)自 16 個(gè)細(xì)胞系的 DNA 進(jìn)行三次處理（每個(gè)工作流程總共 48 個(gè)文庫(kù)）；對(duì)輸入 DNA 進(jìn)行酶切；在捕獲前將樣本以 8 個(gè)為一組進(jìn)行多路復(fù)用并雜交 16 小時(shí)；用 8 個(gè) PCR 循環(huán)擴(kuò)增最終的捕獲后文庫(kù)；并在 Illumina® NovaSeq™ 測(cè)序儀上對(duì)文庫(kù)進(jìn)行測(cè)序（2 x 100 bp）。對(duì)于 KAPA HyperExome 樣本，使用 KAPA HyperPlus 試劑盒、KAPA 通用適配器和 KAPA UDI 引物混合物從 100 ng DNA 制備文庫(kù)；在 8 個(gè)捕獲前 PCR 循環(huán)后在 55oC 下進(jìn)行雜交和清洗。根據(jù)制造商的說(shuō)明，從 50 ng 基因組 DNA 制備供應(yīng)商 X 樣本。為了進(jìn)行分析，測(cè)序數(shù)據(jù)按外顯子組面板大小按比例進(jìn)行子采樣，以實(shí)現(xiàn)相同的目標(biāo)平均覆蓋深度。

通過(guò)好的捕獲均勻性很大程度地提高吞吐量

· 利用設(shè)計(jì)專業(yè)知識(shí)和使用廣泛優(yōu)化的面板來(lái)提高測(cè)序效率

· 即使在難以捕捉的區(qū)域也能實(shí)現(xiàn)最佳的整體平衡

KAPA HyperExome 實(shí)現(xiàn)高度均勻的覆蓋

圖 2. KAPA HyperExome 實(shí)現(xiàn)高度均勻的覆蓋——即使在 %GC 較高或較低的區(qū)域也是如此。

在使用 KAPA HyperExome 探針捕獲之前，使用 KAPA HyperPlus 試劑盒和 KAPA 通用適配器和 KAPA UDI 引物混合物從 100 ng DNA 中制備文庫(kù)。文庫(kù) (8) 在捕獲前進(jìn)行多路復(fù)用，與探針雜交 16 小時(shí)，捕獲后擴(kuò)增，并在 Illumina NovaSeq 測(cè)序儀上測(cè)序 (2 x 100 bp)。條形圖表示來(lái)自 16 個(gè)不同細(xì)胞系的數(shù)據(jù)，重復(fù)處理三次。面板 B 中的每個(gè)數(shù)據(jù)集都來(lái)自不同的細(xì)胞系。

可靠地豐富具有挑戰(zhàn)性的、以前無(wú)法接近的外顯子區(qū)域

· 提高重要基因組數(shù)據(jù)庫(kù)（包括 ACMG59、CCDS 和 ClinVar）中關(guān)鍵研究基因的覆蓋率

· 使用全面而緊湊的 KAPA HyperExome 面板發(fā)現(xiàn)更多變體

可靠地豐富具有挑戰(zhàn)性的、以前無(wú)法接近的外顯子區(qū)域

圖 3.與供應(yīng)商 X Exome 相比，KAPA HyperExome 對(duì)重要基因組數(shù)據(jù)庫(kù)的覆蓋范圍更廣。

確保樣品識(shí)別準(zhǔn)確

研究人員經(jīng)常使用對(duì)照加樣來(lái)跟蹤整個(gè) NGS 工作流程中的樣本。但是，樣本處理錯(cuò)誤仍然會(huì)導(dǎo)致樣本識(shí)別錯(cuò)誤。HyperExome 針對(duì) 387 個(gè)選定的 SNP 位點(diǎn)，將其作為獨(dú)立于樣本處理的內(nèi)在樣本標(biāo)識(shí)符，使研究人員能夠：

· 消除與手動(dòng)添加樣品跟蹤添加物相關(guān)的錯(cuò)誤

· 提高 NGS 結(jié)果的可靠性，增強(qiáng)對(duì)樣本身份的信心

· 減少昂貴的樣品錯(cuò)誤識(shí)別

北京和一生物科技有限公司專業(yè)代理antibodiesinc全系列產(chǎn)品，專營(yíng)進(jìn)口生物試劑，科學(xué)儀器，實(shí)驗(yàn)消耗品，化工原料及藥物中間體等。公司與諸多國(guó)外品牌簽下代理，sigma、santa、RD、Abcam、CST、toxin、streck、Biolegend、ebioscience、saracare、polyplus、Beyotime、Novus、moltox等，能為廣大科研用戶提供數(shù)萬(wàn)種試劑、儀器和實(shí)驗(yàn)消耗品。

我們公司的優(yōu)勢(shì):

1：與500多家公司合作，基本什么品牌都能進(jìn)口，包括血清，抗體，耗材，還有部分限制進(jìn)口的

2：部分產(chǎn)品現(xiàn)貨，物流穩(wěn)定

3：一手貨源，價(jià)格價(jià)格優(yōu)，售后齊全，歡迎新老客戶咨詢訂購(gòu)

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