Jurkat細(xì)胞主要用于研究急性T細(xì)胞白血病的發(fā)病機(jī)制、病理過程等。由于它源自急性T細(xì)胞白血病患者，其細(xì)胞特性與疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，為研究人員提供了良好的體外模型，有助于深入了解白血病細(xì)胞的增殖、分化異常以及相關(guān)基因表達(dá)變化等情況。由于該細(xì)胞具有T細(xì)胞的相關(guān)特性，能夠支持HIV的感染和復(fù)制，科研人員可以利用它來篩選抗HIV藥物，研究HIV與宿主細(xì)胞之間的相互作用，探索HIV感染后免疫系統(tǒng)的變化規(guī)律等。
 

　　Jurkat細(xì)胞的培養(yǎng)與操作注意事項(xiàng)：
 

　　-培養(yǎng)條件：需要在特定的培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，一般為RPMI -1640培養(yǎng)基，并添加10的胎牛血清(FBS)，以保證細(xì)胞的生長和增殖所需的營養(yǎng)物質(zhì)和生長因子。同時，要維持適宜的溫度(通常為37℃)、二氧化碳濃度(一般為5)和濕度等環(huán)境條件。
 

　　-傳代操作：傳代時需要注意適當(dāng)?shù)谋壤?，一般按?:3的比例進(jìn)行傳代，避免細(xì)胞密度過高或過低影響細(xì)胞的生長狀態(tài)。在操作過程中，要嚴(yán)格遵循無菌操作原則，防止細(xì)菌、真菌等污染，因?yàn)橐坏┘?xì)胞被污染，可能會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，甚至導(dǎo)致細(xì)胞系的特性發(fā)生改變。
 

　　-凍存與復(fù)蘇：為了長期保存，可以采用凍存的方法。凍存時需要使用合適的凍存液，一般包含DMSO等成分，以保護(hù)細(xì)胞在低溫下的存活。復(fù)蘇時要注意快速融化，并及時更換新鮮的培養(yǎng)基，讓細(xì)胞適應(yīng)新的生長環(huán)境。
 

　　Jurkat細(xì)胞的測定步驟：
 

　　1.細(xì)胞培養(yǎng)與準(zhǔn)備
 

　　-細(xì)胞復(fù)蘇：從液氮或-80℃冰箱中取出凍存管，迅速放入37℃水浴鍋中，輕輕搖動使其快速融化。在超凈工作臺中，將融化的細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到含有預(yù)熱培養(yǎng)基的離心管中，離心去除凍存液，然后接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中。
 

　　-細(xì)胞計(jì)數(shù)：當(dāng)細(xì)胞生長至一定密度時，取適量細(xì)胞懸液，用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板或自動化細(xì)胞計(jì)數(shù)儀進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，以確定細(xì)胞濃度。
 

　　2.具體實(shí)驗(yàn)測定
 

　　-流式細(xì)胞術(shù)胞內(nèi)染色：計(jì)數(shù)，每個樣品取2×10?的細(xì)胞于無血清的RPMI培養(yǎng)基，37℃ Rest處理1h。每組實(shí)驗(yàn)分為0min/2min/5min的樣，分別用100μl的PBS重懸，轉(zhuǎn)移到96孔板。刺激物和細(xì)胞置于37℃水浴鍋或者金屬浴5min預(yù)熱。加入50μl的3×刺激物，37℃孵育固定時間點(diǎn)后快速加入200μl 4 PFA終止刺激并固定細(xì)胞，輕微吹吸避免細(xì)胞聚團(tuán)，37℃處理15min。
 

　　-細(xì)胞增殖檢測：例如利用CCK-8實(shí)驗(yàn)檢測增殖水平時，將不同濃度的藥物或刺激物與Jurkat細(xì)胞共同培養(yǎng)24h或48h，然后加入CCK-8試劑，繼續(xù)培養(yǎng)一段時間，用酶標(biāo)儀測定吸光度，以評估細(xì)胞增殖情況。