人乳腺癌細胞MCF-7保留了多個分化了的乳腺上皮的特性，包括：能通過胞質雌激素受體加工雌二醇并能形成圓形復合物。MCF7 [MCF-7]細胞含有Tx-4癌基因；腫瘤壞死因子c可以抑制MCF7 [MCF-7]細胞的生長，抗雌激素處理MCF7[MCF-7]細胞能調變IGFBP'S的分泌。

1.實驗目的
恢復凍存的細胞的活性。
2.實驗原理
在實際操作中，凍存細胞要進行復蘇,再培養(yǎng)傳代。復蘇細胞一般采用快速融化法。以保證細胞外結晶快速融化，以避免慢速融化水分滲入細胞內，再次形成胞內結晶損傷細胞。
3.實驗材料
①儀器：CO2培養(yǎng)箱、倒置顯微鏡、超凈臺、離心機、37℃水浴鍋。
②材料：于液氮中保存的人乳腺癌細胞MCF-7細胞凍存管、培養(yǎng)瓶、離心管、移液管，巴斯德吸管、廢液缸、75%酒精棉球、酒精燈、記號筆、鑷子、滅菌細胞培養(yǎng)瓶。
③試劑：RPMI1640*培養(yǎng)基。
4.操作步驟
(1)實驗前準備
①將水浴鍋預熱至37℃，將培養(yǎng)液預熱后分裝到培養(yǎng)皿中。
②離心管、吸管、培養(yǎng)瓶等。
(2)取出凍存管
①根據(jù)細胞凍存記錄按標簽找到所需細胞的編號。
②從液氮罐中取出細胞盒，取出所需的細胞，同時核對管外的編號。
(3)迅速解凍
①迅速將凍存管投入已經(jīng)預熱的水浴鍋中迅速解凍，并要不斷地搖動，使管中的液體迅速融化。
②1~2 min后凍存管內液體*溶解，取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁，再拿入超凈臺內。
(4)制備細胞懸液
①將復蘇細胞直接轉入已添加培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶內，置于37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)（培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊）。
②第2天（在細胞貼壁生長24 h前），用新鮮的培養(yǎng)基給細胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。
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