活性蛋白質(zhì) 返回列表頁

　　活性蛋白質(zhì)是指一種復(fù)雜的有機化合物。構(gòu)成蛋白質(zhì)的基本單位是氨基酸，氨基酸經(jīng)脫水縮合后再形成肽鏈。蛋白質(zhì)是生物大分子，由一條或多條多肽鏈組成，每條多肽鏈有20到幾百個氨基酸殘基。各種氨基酸的殘基又按一定的順序排列。它一方面直接參與皮膚細(xì)胞基因表達(dá)與生理信號的傳遞，從而從源頭上修復(fù)細(xì)胞，阻斷衰老。另一方面能營養(yǎng)肌膚，提高肌膚自身的調(diào)節(jié)能力，立體式構(gòu)建和維護肌膚生態(tài)環(huán)境，從而達(dá)到抗衰老和護膚的目的。

　　原來是從溶液離子的活動度和酶的活性開始，上至高級生命系統(tǒng)和生理機構(gòu)的功能活動都適用的一種極其概括的非專門術(shù)語?；钚允侵妇哂猩?能夠頑強活躍下去的一種活動性質(zhì)。

　　對賦予活性意義時，一般使用活性化或激活（activation）；在指去除活性時，則使用非活性化或失活（inactivation）等詞。在刺激生理學(xué)中有關(guān)興奮膜的反應(yīng)性（reactivity），對不限于簡單地被動去極化并伴有一定結(jié)構(gòu)上的變換被看作是主動的（active）而不連續(xù)的反應(yīng)，也用此詞來稱呼。

　　生長蛋白因子是一類通過與特異的、高親和的細(xì)胞膜受體結(jié)合，調(diào)節(jié)細(xì)胞生長與其他細(xì)胞功能等多效應(yīng)的多肽類物質(zhì)。存在于血小板和各種成體與胚胎組織及大多數(shù)培養(yǎng)細(xì)胞中，對不同種類細(xì)胞具有一定的專一性。通常培養(yǎng)細(xì)胞的生長需要多種生長因子順序的協(xié)調(diào)作用，腫瘤細(xì)胞具有不依賴生長因子的自主性生長的特點。在分泌特點上，生長因子主要屬于自分泌（autocrine）和旁分泌（paracrine）。許多生長因子已被提純和確定了其結(jié)構(gòu)組成。如血小板來源的生長因子（PDGF）是個熱穩(wěn)定、具較高正電荷的蛋白質(zhì)，由含有二硫鍵的二聚體組成，分子量30000道爾頓左右。又如表皮生長因子（EGF）是個熱穩(wěn)定、含有53個氨基酸殘基的多肽，分子量為6000道爾頓左右。各類生長因子都有其相應(yīng)的受體，是普遍存在于細(xì)胞膜上的跨膜蛋白，不少受體具有激酶活性，特別是酪氨酸激酶活性（如PDGF受體、 EGF受體等）。生長因子有多種，如血小板類生長因子（血小板來源生長因子，PDGF；骨肉瘤來源生長因子ODGF）、表皮生長因子類（表皮生長因子，EGF、轉(zhuǎn)化生長因子，TGFα和TGFβ）、成纖維細(xì)胞生長因子（αFGF、βFGF）、類胰島素生長因子（IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ）、神經(jīng)生長因子（NGF）、白細(xì)胞介素類生長因子（IL-1、IL-1、IL-3等）、紅細(xì)胞生長素（EPO）、集落刺激因子（CSF）等。

　　活性蛋白提取試劑盒適用于從各種原代或傳代細(xì)胞和各種實體組織，如腦、脊髓、神經(jīng)結(jié)或纖維、脂肪、肝臟、消化道、腎臟、心臟、肌肉、血管、結(jié)締組織等哺乳動物組織中提取蛋白。提取過程簡單方便，可在1小時內(nèi)完成。該試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物，阻止了蛋白酶對蛋白的降解，為提取高純度的蛋白提供了保證。本試劑盒含有的*配方能夠溶解細(xì)胞膜包括細(xì)胞質(zhì)膜和核膜。提取的蛋白可用于蛋白質(zhì)電泳、免疫共沉淀、酶活測定等下游蛋白研究。

　　使用方法:

　　細(xì)胞蛋白提取:

　　1.提取液制備:每50Oul冷的蛋白提取液中加入2ul蛋白酶抑制劑混合物和2ul磷酸酶抑制劑混合物,混勻后置冰上備用。

　　2.取5-10×106個細(xì)胞，在4℃，1000rpm條件下離心5-10分鐘，小心吸取培養(yǎng)基，盡可能吸干，收集細(xì)胞。

　　3.用冷PBS洗滌細(xì)胞兩次，每次洗滌后盡可能吸千上清。4.每5×106個細(xì)胞中加入500ul冷的'蛋白提取液，混勻后，在4℃條件下振蕩15-20分鐘。

　　5.在4℃，14000rpm條件下離心15分鐘。

　　6.快速將上清吸入另一預(yù)冷的干凈離心管，即可得到蛋白樣品。

　　7.將上述蛋白提取物定量后分裝于-80°℃冰箱保存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌嶒?。組織蛋白提取:

　　1.提取液制備:每500ul冷的蛋白提取液中加入2ul蛋白酶抑制劑混合物和2ul磷酸酶抑制劑混合物，混勻后置冰上備用。

　　2.取100mg組織樣本剪碎，加入蛋白提取液，用組織勻漿器勻漿至無明顯肉眼可見固體。

　　3.將組織勻漿吸入一預(yù)冷的干凈離心管中，在4℃，10000rpm條件下離心5分鐘。

　　4.將上清吸入另一預(yù)冷的干凈離心管，即可得到活性蛋白樣品。

　　5.將上述蛋白提取物定量后分裝于-80℃冰箱保存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌嶒灐?/p>