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活性蛋白 重組人 EPHA3

產(chǎn)品貨號(hào)：AA10095

規(guī)格：20ug 100ug 1mg

產(chǎn)品詳情

純度：Greater than 95% as determined by SDS-PAGE.

內(nèi)毒素：Less than 1.0 EU/ug as determined by LAL method.

生物活性：①Measured by its binding ability in a functional ELISA. Immobilized EPHA3 at 2 μg/ml can bind human EFNA5, the EC50 of the protein is 0.9734-1.179 ng/ml. ②Human EPHA3 protein his tag captured on COOH chip can bind Human EFNA5 protein Fc tag with an affinity constant of 13.8 nM as detected by LSPR Assay.

基因名：EPHA3

Uniprot No.：P29320

別名：AW492086; Cek4; EC 2.7.10.1; EK4; End3; Eph receptor A3; EPH-like kinase 4; EPH-like tyrosine kinase 1; EPHA3; EPHA3_HUMAN; Ephrin receptor EphA3; Ephrin type-A receptor 3; ETK 1; ETK; ETK1; HEK 4; HEK; HEK4; Human embryo kinase 1; Human embryo kinase; Mek4; MGC109882; Receptor tyrosine kinase HEK; Testicular tissue protein Li 64; Tyro 4; Tyro4; TYRO4 protein tyrosine kinase; Tyrosine protein kinase receptor ETK 1; Tyrosine-protein kinase receptor ETK1; Tyrosine-protein kinase TYRO4

種屬：Homo sapiens (Human)

蛋白長(zhǎng)度：Partial

來(lái)源：Mammalian cell

分子量：61.0 kDa

表達(dá)區(qū)域：21-541aa

活性蛋白 重組人 EPHA3

產(chǎn)品貨號(hào)：AA10095

規(guī)格：20ug 100ug 1mg

蛋白標(biāo)簽：C-terminal 6xHis-tagged

產(chǎn)品提供形式：Liquid or Lyophilized powder

產(chǎn)品描述：人Ephrin Type-A receptor 3 (EPHA3)是一種膜酪氨酸激酶受體，與Ephrin家族配體混雜結(jié)合。EPHA3參與遷移和細(xì)胞黏附過程，從而介導(dǎo)間質(zhì)轉(zhuǎn)化和黏附灶組裝。所以它是一種已知的結(jié)直腸癌致癌基因。該重組蛋白在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中表達(dá)，并與c端6xHis-tag融合。表達(dá)區(qū)域?yàn)槿薊PHA3蛋白的21-541aa，分子量為61 kDa。SDS-PAGE測(cè)定，最終產(chǎn)物純度大于95%。用ELISA和LSPR檢測(cè)重組蛋白的生物物理參數(shù)。在功能ELISA中，重組蛋白與人EFNA5的EC50為0.9734-1.179 ng/ml。LSPR測(cè)定其與人EFNA5的親和力常數(shù)為13.8 nM。該蛋白產(chǎn)品可用于ELISA和表面等離子體共振，以確定其配體在樣品中的存在和濃度，并作為配體結(jié)合試驗(yàn)的對(duì)照。也可作為免疫原免疫兔或其他動(dòng)物獲得相應(yīng)的抗體，應(yīng)用于免疫反應(yīng)途徑相關(guān)的免疫學(xué)研究。最終產(chǎn)物內(nèi)毒素含量較低，LAL法測(cè)定內(nèi)毒素含量小于1.0 EU/µg。

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宿主菌的選擇

重組質(zhì)粒的構(gòu)建一般選擇遺傳穩(wěn)定，轉(zhuǎn)化效率高，質(zhì)粒產(chǎn)量高的菌株作為受體菌，常用的有E.coli DH5α，E.coli JM 109，E.coli DH 10B ，E.coli NovaBlμe等。作為表達(dá)宿主菌必須具備幾個(gè)基本特點(diǎn)：遺傳穩(wěn)定，生長(zhǎng)速度快，表達(dá)蛋白穩(wěn)定。

具體操作過程中，根據(jù)所使用的表達(dá)載體的特點(diǎn)，目的基因密碼子的組成等選擇特定的表達(dá)宿主菌。以下是常用的幾種表達(dá)宿主：
BL2： lon和ompT 蛋白酶缺陷型，避免了宿主對(duì)外源蛋白的降解。是經(jīng)典的使用*泛的表達(dá)受體。適用于Tac，Trc，Lac，λPL，cspA等作為啟動(dòng)子的載體。
BL21（DE3）： DE3噬菌體溶源于BL21 形成的帶有染色體T7 RNA 聚合酶基因大腸桿菌。IPTG 誘導(dǎo)的lacΜV5 啟動(dòng)子控制T7 RNA 聚合酶基因表達(dá)T7 RNA 聚合酶，進(jìn)而控制T7 表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)目的蛋白。