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重組人 活性蛋白 NRP1

產(chǎn)品貨號：AA10236

規(guī)格：20ug 100ug 1mg

產(chǎn)品詳情

純度：Greater than 95% as determined by SDS-PAGE.

內(nèi)毒素：Less than 1.0 EU/ug as determined by LAL method.

生物活性：Measured by its binding ability in a functional ELISA. Immobilized human VEGF165  at 2 μg/ml can bind human NRP1, the EC50 is 22.68-34.55 ng/ml.

基因名：NRP1

Uniprot No.：O14786

別名：(Vascular endothelial cell growth factor 165 receptor)(CD304)

種屬：Homo sapiens (Human)

蛋白長度：Full Length of Mature Protein of Isoform 2

來源：Mammalian cell

分子量：98.8 kDa

表達(dá)區(qū)域：22-644aa

重組人 活性蛋白 NRP1

產(chǎn)品貨號：AA10236

規(guī)格：20ug 100ug 1mg

蛋白標(biāo)簽：C-terminal hFc-tagged

產(chǎn)品提供形式：Lyophilized powder

產(chǎn)品描述：NRP1亞型2的氨基酸22-644編碼的基因片段在哺乳動物細(xì)胞中表達(dá)，其c端帶有人類Fc標(biāo)簽。該產(chǎn)品是重組人NRP1蛋白。NRP1蛋白已被證實具有活性。在功能性ELISA中，固定化的人VEGF165可以結(jié)合NRP1蛋白。EC50為22.68-34.55 ng/ml。純度可達(dá)95%。在SDS-PAGE中，該蛋白遷移到凝膠上分子量約116 kDa的條帶上。LAL法測定其內(nèi)毒素小于1.0 EU/ug。這種重組NRP1蛋白是存在的。

NRP1是一個信號和催化蛋白家族的成員，以兩種亞型存在:分泌型(sNRP1)和跨膜型(sNRP1)。已知sNRP1在宮頸癌中抑制細(xì)胞相關(guān)的NRP-1功能。宮頸癌患者的循環(huán)sNRP-1水平顯著升高。NRP1的跨膜形態(tài)通過與VEGF、Sema3A、TGF-β、叢狀蛋白和整合素的相互作用，在神經(jīng)和心血管系統(tǒng)的發(fā)育、腫瘤發(fā)生和病毒進(jìn)入過程中發(fā)揮重要作用。研究表明，NRP1促進(jìn)了SARS-CoV-2進(jìn)入宿主細(xì)胞，并顯著增強了SARS-CoV-2的體外感染性。

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宿主菌的選擇

重組質(zhì)粒的構(gòu)建一般選擇遺傳穩(wěn)定，轉(zhuǎn)化效率高，質(zhì)粒產(chǎn)量高的菌株作為受體菌，常用的有E.coli DH5α，E.coli JM 109，E.coli DH 10B ，E.coli NovaBlμe等。作為表達(dá)宿主菌必須具備幾個基本特點：遺傳穩(wěn)定，生長速度快，表達(dá)蛋白穩(wěn)定。

具體操作過程中，根據(jù)所使用的表達(dá)載體的特點，目的基因密碼子的組成等選擇特定的表達(dá)宿主菌。以下是常用的幾種表達(dá)宿主：
BL2： lon和ompT 蛋白酶缺陷型，避免了宿主對外源蛋白的降解。是經(jīng)典的使用*泛的表達(dá)受體。適用于Tac，Trc，Lac，λPL，cspA等作為啟動子的載體。
BL21（DE3）： DE3噬菌體溶源于BL21 形成的帶有染色體T7 RNA 聚合酶基因大腸桿菌。IPTG 誘導(dǎo)的lacΜV5 啟動子控制T7 RNA 聚合酶基因表達(dá)T7 RNA 聚合酶，進(jìn)而控制T7 表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)目的蛋白。