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P3086-pLKO.1-TRC-SP6基因沉默質(zhì)粒
  • P3086-pLKO.1-TRC-SP6基因沉默質(zhì)粒
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更新時(shí)間:2025-05-08 21:00:08

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pLKO.1-TRC-SP6基因沉默質(zhì)粒
啟動(dòng)子U6
復(fù)制子SV40 Ori,F(xiàn)1 Ori
終止子SV40 poly(A) signal,bGH poly(A) signal
質(zhì)粒分類病毒系列,慢病毒干擾載體
質(zhì)粒標(biāo)簽Stuffer
原核抗性Amp
真核抗性Puro
克隆菌株Stbl3
培養(yǎng)條件37℃
表達(dá)宿主哺乳細(xì)胞
誘導(dǎo)方式無(wú)須誘導(dǎo),瞬時(shí)表達(dá)

注意事項(xiàng):轉(zhuǎn)化前請(qǐng)準(zhǔn)確查找該質(zhì)粒相應(yīng)的抗生素名稱、抗生素使用濃度、感受態(tài)名稱和培養(yǎng)溫度。
1、收到質(zhì)粒干粉后請(qǐng)先5000rpm離心1min,再加入20μl~50μl無(wú)菌水或 pH8.0  1*TE緩沖液來(lái)溶解質(zhì)粒,室溫放置1min

2、從-80冰箱中取出相應(yīng)的感受態(tài),置于冰盒上解凍,并做好標(biāo)記;

3、取2μl質(zhì)粒加至100μl感受態(tài)中,冰浴30min;

442熱激90s,再冰浴2min

5、加入900μl無(wú)抗的LB液體培養(yǎng)基,180rpm震蕩培養(yǎng)45min;

66000rpm離心5min,僅留100ul上清混勻菌體沉淀;

7、混勻后的菌液加至對(duì)應(yīng)抗性的LB平板上,倒入適量玻璃珠,涂勻液體;

8、將平板正向培養(yǎng)1h,再倒置培養(yǎng)12h~16h;

9、挑取單克隆菌落至對(duì)應(yīng)抗性的LB液體培養(yǎng)基中,震蕩培養(yǎng)12h~16h,根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要提取質(zhì)粒

 

pLKO.1-Puro基因沉默質(zhì)粒
pLKO.1-TRC-SP6基因沉默質(zhì)粒
pLKO.1基因沉默質(zhì)粒
pLKO.1-EGFP基因沉默質(zhì)粒
pLEX-MCS蛋白表達(dá)質(zhì)粒
pLEGFP-N1蛋白表達(dá)質(zhì)粒
pCDF1-MCS2-EF1-Puro蛋白表達(dá)質(zhì)粒
pCDH-ECMV-MCS-3×FLAG-EF1α-ZsGreen1-T2A-Puro蛋白表達(dá)質(zhì)粒
pCDH-MSCV-MCS-EF1a-CopGFP-T2A-Puro蛋白表達(dá)質(zhì)粒
pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP蛋白表達(dá)質(zhì)粒
pCDH-CMV-MCS-EF1-Puro蛋白表達(dá)質(zhì)粒

 

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