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P20177-Cbh_v5 AAV-CBE N-terminal基因編輯質(zhì)粒
  • P20177-Cbh_v5 AAV-CBE N-terminal基因編輯質(zhì)粒
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Cbh_v5 AAV-CBE N-terminal基因編輯質(zhì)粒
別名Plasmid#137175
啟動(dòng)子U6
復(fù)制子pUC
克隆菌株Stbl3
培養(yǎng)條件37度
質(zhì)粒宿主哺乳細(xì)胞,腺相關(guān)病毒
質(zhì)粒用途基因編輯
片段類型CRISPR
片段物種空載體
原核抗性Amp

一、載體構(gòu)建的基本實(shí)驗(yàn)步驟
(1)目的DNA片段和載體的制備;
(2)目的DNA片段和載體的連接;
(3)連接產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化;
(4)克隆篩選。
(5)測(cè)序驗(yàn)證及結(jié)果交付

 

二、詳細(xì)內(nèi)容
1、以PCR擴(kuò)增為基礎(chǔ)的各類載體構(gòu)建,如大腸桿菌表達(dá)載體、酵母表達(dá)載體、桿狀病毒表達(dá)載體、哺乳動(dòng)物表達(dá)載體;報(bào)告基因載體等;
2、基因定點(diǎn)突變,包括單點(diǎn)突變,多點(diǎn)突變,基因缺失等;
3、載體元件替換和改造;
4、siRNA載體和miRNA表達(dá)載體構(gòu)建;
5、過表達(dá)載體構(gòu)建。

 

pLKO.1-EGFP-Puro-RNF216-shRNA1基因沉默質(zhì)粒
pET28a-K-Ras蛋白表達(dá)質(zhì)粒
pLVshRNA-EGFP(2A)Puro-CD19-shRNA2(human)基因沉默質(zhì)粒
pACYC177-T7蛋白表達(dá)質(zhì)粒
pCold-SUMO-NP(virus)蛋白表達(dá)質(zhì)粒
pCold-SUMO-NA(virus)蛋白表達(dá)質(zhì)粒
psh-EGFP-puro-ZEB1(human)基因沉默質(zhì)粒
pLKO.1-Puro-MAPK3-shRNA4(human)基因沉默質(zhì)粒
pMSCVpuro-6xHis-Ass1(mouse)蛋白表達(dá)質(zhì)粒

 

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