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一、載體構建的基本實驗步驟
(1)目的DNA片段和載體的制備;
(2)目的DNA片段和載體的連接;
(3)連接產(chǎn)物的轉化;
(4)克隆篩選。
(5)測序驗證及結果交付
二、詳細內(nèi)容
1、以PCR擴增為基礎的各類載體構建,如大腸桿菌表達載體、酵母表達載體、桿狀病毒表達載體、哺乳動物表達載體;報告基因載體等;
2、基因定點突變,包括單點突變,多點突變,基因缺失等;
3、載體元件替換和改造;
4、siRNA載體和miRNA表達載體構建;
5、過表達載體構建。
pMIGR1-smURFP-murine-Rela-m-p65蛋白表達質粒 |
pNZ8148蛋白表達質粒 |
pLEGFP-WT-STAT3(無熒光)蛋白表達質粒 |
pVSV-G輔助包裝質粒 |
pttq18蛋白表達質粒 |
pEZZ18蛋白表達質粒 |
pSUMO-mut蛋白表達質粒 |
pSUMO蛋白表達質粒 |
pTYB1蛋白表達質粒 |
pBV221蛋白表達質粒 |
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