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P1236-pDM4基因編輯質(zhì)粒
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pDM4基因編輯質(zhì)粒
復(fù)制子R6Kγori,oriT
質(zhì)粒分類(lèi)大腸系列質(zhì)粒;大腸編輯質(zhì)粒;大腸SacB質(zhì)粒
質(zhì)粒大小7104bp
原核抗性Chl
克隆菌株S17-1λpir
培養(yǎng)條件37℃
5'測(cè)序引物Cat-R(GGTATTTATTCGGCGCAAAGTGC)
3'測(cè)序引物Cat-F(GTGACAATCACGAAACGCGG)
質(zhì)粒宿主大腸桿菌
質(zhì)粒用途基因編輯

一、載體構(gòu)建的基本實(shí)驗(yàn)步驟
(1)目的DNA片段和載體的制備;
(2)目的DNA片段和載體的連接;
(3)連接產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化;
(4)克隆篩選。
(5)測(cè)序驗(yàn)證及結(jié)果交付

 

二、詳細(xì)內(nèi)容
1、以PCR擴(kuò)增為基礎(chǔ)的各類(lèi)載體構(gòu)建,如大腸桿菌表達(dá)載體、酵母表達(dá)載體、桿狀病毒表達(dá)載體、哺乳動(dòng)物表達(dá)載體;報(bào)告基因載體等;
2、基因定點(diǎn)突變,包括單點(diǎn)突變,多點(diǎn)突變,基因缺失等;
3、載體元件替換和改造;
4siRNA載體和miRNA表達(dá)載體構(gòu)建;
5、過(guò)表達(dá)載體構(gòu)建。

 

pLKO.1.sh.beta-catenin.1248基因沉默質(zhì)粒
pLKO.1.sh.beta-catenin.2279基因沉默質(zhì)粒
pBV220-6×His蛋白表達(dá)質(zhì)粒
pDM4基因編輯質(zhì)粒
pLKO.1-Puro-ZFP-shRNA1基因沉默質(zhì)粒
pLKO.1-Puro-ZFP-shRNA2基因沉默質(zhì)粒
pLKO.1-Puro-TZAP-shRNA1基因沉默質(zhì)粒
pLKO.1-Puro-TZAP-shRNA2基因沉默質(zhì)粒
pJQ200SK基因編輯質(zhì)粒
pLKO.1-Puro-DDX43-shRNA2基因沉默質(zhì)粒

 

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