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P0385-pET28a-PPK蛋白表達質(zhì)粒
  • P0385-pET28a-PPK蛋白表達質(zhì)粒
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貨物所在地:上海上海

地: 上海

更新時間:2025-05-08 21:00:08

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pET28a-PPK蛋白表達質(zhì)粒
啟動子T7
復(fù)制子ori,F(xiàn)1 ori
終止子T7 terminator
質(zhì)粒分類基因文庫質(zhì)粒;其它基因質(zhì)粒;其它種源質(zhì)粒
質(zhì)粒大小7297bp
質(zhì)粒標簽C-6×His
原核抗性Kan
克隆菌株DH5α
培養(yǎng)條件37℃
表達宿主BL21(DE3)大腸桿菌
培養(yǎng)條件37℃,有氧,LB
誘導(dǎo)方式IPTG或乳糖及其類似物
質(zhì)粒宿主大腸桿菌

注意事項:轉(zhuǎn)化前請準確查找該質(zhì)粒相應(yīng)的抗生素名稱、抗生素使用濃度、感受態(tài)名稱和培養(yǎng)溫度。
1、收到質(zhì)粒干粉后請先5000rpm離心1min,再加入20μl~50μl無菌水或 pH8.0  1*TE緩沖液來溶解質(zhì)粒,室溫放置1min;

2、從-80冰箱中取出相應(yīng)的感受態(tài),置于冰盒上解凍,并做好標記;

3、取2μl質(zhì)粒加至100μl感受態(tài)中,冰浴30min

4、42熱激90s,再冰浴2min

5、加入900μl無抗的LB液體培養(yǎng)基,180rpm震蕩培養(yǎng)45min;

66000rpm離心5min,僅留100ul上清混勻菌體沉淀;

7、混勻后的菌液加至對應(yīng)抗性的LB平板上,倒入適量玻璃珠,涂勻液體;

8、將平板正向培養(yǎng)1h,再倒置培養(yǎng)12h~16h;

9、挑取單克隆菌落至對應(yīng)抗性的LB液體培養(yǎng)基中,震蕩培養(yǎng)12h~16h,根據(jù)實驗需要提取質(zhì)粒

 

pET21a-beta subunit-beta' subunit蛋白表達質(zhì)粒
pGH-ADH2基因模板質(zhì)粒
pGADT7-GW雜交質(zhì)粒
pGBKT7-GW雜交質(zhì)粒
pGEM-4Z基因模板質(zhì)粒
pBV220-mCherry蛋白表達質(zhì)粒
pLentiCRISPRV2-DHODH-sgRNA3(human)基因編輯質(zhì)粒
pLentiCRISPRV2-CRACD-sgRNA1(human)基因編輯質(zhì)粒
pLentiCRISPRV2-CRACD-sgRNA3(human)基因編輯質(zhì)粒
pDONR201基因模板質(zhì)粒

 

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