重組人 SEMA4D 活性蛋白

產(chǎn)品貨號：AA10301

規(guī)格：20ug 100ug 1mg

產(chǎn)品詳情

純度：Greater than 95% as determined by SDS-PAGE.

內(nèi)毒素：Less than 1.0 EU/ug as determined by LAL method.

生物活性：①Measured by its binding ability in a functional ELISA. Immobilized human SEMA4D at 2 μg/mL can bind biotinylated Pepinemab, the EC50 is 1.005-1.776 ng/mL. ②Measured by its binding ability in a functional ELISA. Immobilized human SEMA4D at 5 μg/mL can bind human PLXNB1, the EC50 is 0.8179-1.357 μg/mL.

基因名：SEMA4D

Uniprot No.：Q92854

別名：(A8)(BB18)(GR3)(CD100)

種屬：Homo sapiens (Human)

蛋白長度：Partial

來源：Mammalian cell

分子量：108.1

表達(dá)區(qū)域：22-734aa

重組人 SEMA4D 活性蛋白

產(chǎn)品貨號：AA10301

規(guī)格：20ug 100ug 1mg

蛋白標(biāo)簽：C-terminal hFc-tagged

產(chǎn)品提供形式：Lyophilized powder

產(chǎn)品描述：c-末端hfc標(biāo)記的人類信號素4d (SEMA4D)是一種在哺乳動物細(xì)胞中表達(dá)的活性重組蛋白。其表達(dá)區(qū)與人類SEMA4D的22-734氨基酸相對應(yīng)。經(jīng)SDS-PAGE檢測，該SEMA4D蛋白純度大于95%。它遷移到凝膠上約120 kDa的分子量帶。LAL法測定其內(nèi)毒素小于1.0 EU/ug。在功能性ELISA中，重組SEMA4D蛋白可以結(jié)合生物素化的Pepinemab。EC50為1.005-1.776 ng/mL。SEMA4D，也被稱為CD100，參與免疫調(diào)節(jié)、骨形成、血小板失活、血管生成刺激和癌癥骨轉(zhuǎn)移。

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宿主菌的選擇

重組質(zhì)粒的構(gòu)建一般選擇遺傳穩(wěn)定，轉(zhuǎn)化效率高，質(zhì)粒產(chǎn)量高的菌株作為受體菌，常用的有E.coli DH5α，E.coli JM 109，E.coli DH 10B ，E.coli NovaBlμe等。作為表達(dá)宿主菌必須具備幾個基本特點(diǎn)：遺傳穩(wěn)定，生長速度快，表達(dá)蛋白穩(wěn)定。

具體操作過程中，根據(jù)所使用的表達(dá)載體的特點(diǎn)，目的基因密碼子的組成等選擇特定的表達(dá)宿主菌。以下是常用的幾種表達(dá)宿主：

BL2： lon和ompT 蛋白酶缺陷型，避免了宿主對外源蛋白的降解。是經(jīng)典的使用*泛的表達(dá)受體。適用于Tac，Trc，Lac，λPL，cspA等作為啟動子的載體。

BL21（DE3）： DE3噬菌體溶源于BL21 形成的帶有染色體T7 RNA 聚合酶基因大腸桿菌。IPTG 誘導(dǎo)的lacΜV5 啟動子控制T7 RNA 聚合酶基因表達(dá)T7 RNA 聚合酶，進(jìn)而控制T7 表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)目的蛋白。