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帶你了解尺寸排阻色譜柱的相關(guān)知識(shí)點(diǎn)

閱讀：1530 發(fā)布時(shí)間：2022-8-28

尺寸排阻色譜柱由親水性球形聚甲基丙烯酸酯顆粒填充，主要針對(duì)小分子蛋白、蛋白片段、多肽、寡核苷酸的分離分析。

特點(diǎn)：

1.保留時(shí)間是分子尺寸的函數(shù)，有可能提供分子結(jié)構(gòu)的某些信息。2.保留時(shí)間短，譜峰窄，易檢測(cè)，可采用靈敏度較低的檢測(cè)器。

3.固定相與分子間作用力極弱，趨于零。由于,柱子不能很強(qiáng)保留分子因此柱壽命長(zhǎng)。

4.不能分辨分子大小相近的化合物，相對(duì)分子質(zhì)量差別必須大于10％能得以分離。

5.大分子的流程短，移動(dòng)速度快，先流出色譜柱；小分子的流程長(zhǎng)，移動(dòng)速度慢，后流出色柱；而中等分子居兩者之間。

6.生物相容性好，有很高的活性回收率。

流動(dòng)相的選擇：

排阻色譜所選用的流動(dòng)相必須能溶解樣品，并必須與凝膠本身非常相似，這樣才能潤(rùn)濕凝膠。當(dāng)采用軟性凝膠時(shí)，溶劑也必須能溶脹凝膠。溶劑的粘度要小，因?yàn)楦哒扯热軇┩拗品肿訑U(kuò)散作用而影響分離效果。

尺寸排阻色譜柱的保存：

日常使用中，建議保存在150mM磷酸鹽緩沖液中(pH7.0)。如長(zhǎng)期不用時(shí)，可將色譜柱保存至20%乙醇中，以防止菌體污染。(注：可根據(jù)具體使用條件選擇保存方式，如實(shí)驗(yàn)條件為緩