從肝臟組織中制備細(xì)胞核2022/9/14

一、材料與儀器：大鼠、裂解緩沖液、濃蔗糖溶液、超速離心機(jī)、組織研磨器二、實(shí)驗(yàn)步驟：1.配制裂解緩沖液和濃蔗糖溶液（PMSF在使用前添加），冰上放置。裂解緩沖液:①0.25mol/L蔗糖網(wǎng)織紅細(xì)胞標(biāo)準(zhǔn)緩...

從哺乳動(dòng)物細(xì)胞或組織分離DNA2022/9/9

材料與儀器：細(xì)胞、TBS抽提緩沖液、離心管實(shí)驗(yàn)步驟：步驟1：根據(jù)樣品類型，從下列方法中選一個(gè)作為步驟1進(jìn)行操作。(1)細(xì)胞樣品①單層培養(yǎng)的細(xì)胞以用冰預(yù)冷的TBS將單層細(xì)胞洗滌2次，用刮棒把細(xì)胞刮入約0...

細(xì)胞凍存和復(fù)蘇實(shí)驗(yàn)2022/9/1

實(shí)驗(yàn)方法原理：細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的基本原理是慢凍快解凍，已被證明能最大限度地提高細(xì)胞活力。目前常用甘油或二甲基亞砜作為細(xì)胞低溫保存的保護(hù)劑。這兩種物質(zhì)可以提高細(xì)胞膜對(duì)水的滲透性，再加上緩慢的冷凍可以使細(xì)胞...

標(biāo)記細(xì)胞株要如何保存？2022/8/9

細(xì)胞株是用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法，由單細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群。細(xì)胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個(gè)培養(yǎng)期間始終存在。原代培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后即為細(xì)胞系，由原先存在于原代培養(yǎng)物中的細(xì)胞世系所組成。如果不...

細(xì)胞培養(yǎng)基介紹2022/7/14

細(xì)胞培養(yǎng)基的概念01細(xì)胞培養(yǎng)基是人工模擬細(xì)胞在體內(nèi)生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境，并提供細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的基礎(chǔ)物質(zhì)。細(xì)胞培養(yǎng)基是細(xì)胞培養(yǎng)的基礎(chǔ)，它為動(dòng)物細(xì)胞的健康快速成長(zhǎng)提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。所以，只要用到細(xì)胞進(jìn)行...

C57小鼠皮膚成纖維細(xì)胞原代培養(yǎng)的方法2022/7/14

實(shí)驗(yàn)方法1.將實(shí)驗(yàn)小鼠脫頸處死，75%乙醇浸泡5min，固定，備皮，取背部皮膚至于含雙抗的冷PBS緩沖液中。2.仔細(xì)剝離脂肪，血管等多余組織，PBS清洗，加胰酶消化1h。3.分離真表皮，去除表皮后，P...

說說關(guān)于細(xì)胞外泌體研究的幾個(gè)重要問題2022/7/6

外泌體是細(xì)胞分泌到胞外的一種囊泡，其大小為30-150nm，具有雙層膜結(jié)構(gòu)和茶托狀形態(tài)，含有豐富的內(nèi)含物（包括核酸、蛋白和脂質(zhì)等），參與細(xì)胞間的分子傳遞。外泌體廣泛存在于細(xì)胞培養(yǎng)上清以及各種體液中，細(xì)...

SD大鼠乳鼠心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞原代分離培養(yǎng)方法2022/7/5

1.將新生24h的SD大鼠用75%乙醇浸泡5min，開胸，取出心臟后于含有雙抗的預(yù)冷過的D-HANKS中漂洗兩遍，移入超凈臺(tái)。2.仔細(xì)剪除大血管，左右心房及右心室和室間隔，保留左心室，去除內(nèi)、外膜，P...

新生SD大鼠大腦皮層神經(jīng)元原代分離培養(yǎng)方法2022/6/30

一.實(shí)驗(yàn)方法1.多聚賴氨酸（Poly-D-Lysine）包被培養(yǎng)板的制備：原代分離進(jìn)行前一天，用PBS緩沖液配制終濃度為0.1mg/ml的多聚賴氨酸工作液，0.22μm濾膜過濾除菌，于超凈工作臺(tái)內(nèi)吸取...

原代細(xì)胞分離培養(yǎng)都有哪幾種方法？2022/6/14

研究中常用的細(xì)胞系/株系是現(xiàn)成的，我們只需要進(jìn)行細(xì)胞傳代和種子保存。然而，這些細(xì)胞系往往因長(zhǎng)期體外培養(yǎng)而失去原有的生物學(xué)特性，對(duì)藥物治療的反應(yīng)差距越來越大。因此，越來越多的人選擇原代細(xì)胞。來源于胚胎、...

充質(zhì)干細(xì)胞涉及的研究竟然這么多2022/5/11

充質(zhì)干細(xì)胞是人體內(nèi)一類具有自我更新和多向分化潛能的原始細(xì)胞群。根據(jù)遺傳來源的分類，干細(xì)胞可分為胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞。其中，胚胎干細(xì)胞具有發(fā)育全能性，是干細(xì)胞研究和應(yīng)用中具吸引力的一種。然而，關(guān)于胚胎...

原代細(xì)胞分離培養(yǎng)有哪些注意事項(xiàng)？2022/4/13

原代細(xì)胞分離培養(yǎng)有哪些注意事項(xiàng)？1、組織塊培養(yǎng)法（1）接種后的前3天，觀察和移動(dòng)時(shí)注意不要引起液體振蕩。避免頻繁的翻倒和振動(dòng)，否則組織塊不易附著在瓶壁上或附著后脫落飄浮。（2）加入的培養(yǎng)基不宜過多，以...

充質(zhì)干細(xì)胞的醫(yī)療價(jià)值真的很高2022/3/15

充質(zhì)干細(xì)胞是一種早期未分化細(xì)胞，具有自我更新、自我復(fù)制、無限增殖和多向分化潛能等特點(diǎn)。它們可以分泌細(xì)胞因子，減輕炎癥，減少組織細(xì)胞凋亡，促進(jìn)內(nèi)源性組織器官干祖細(xì)胞的增殖，進(jìn)行免疫調(diào)節(jié)，從而達(dá)到作為種子...

腸道腫瘤類器官的研究與應(yīng)用2022/2/23

ONCOGENESIS|腸道腫瘤類器官的應(yīng)用研究類器官（Organoids）類器官是一項(xiàng)創(chuàng)新性較高的研究技術(shù)，近幾年來受到科研人士的追捧和廣泛好評(píng)。目前，我們國(guó)家在政策層面也給予了大力地支持。2021...

細(xì)胞污染的辨別2022/2/23

細(xì)胞污染的辨別細(xì)胞污染有很多種不同的類型，不同情況的細(xì)胞污染其表現(xiàn)也不同，檢測(cè)方法也有所不同。不過大部分的細(xì)胞污染，用肉眼加鏡檢就可以解決啦！細(xì)胞污染一般分細(xì)菌污染，真菌污染，支原體污染，黑膠蟲等。1...