提供一些關(guān)于iPSC培養(yǎng)基的應(yīng)用案例

 

iPSC的維持和擴(kuò)增：Gibco™Essential8™培養(yǎng)基是一種無滋養(yǎng)層、無外源成分的培養(yǎng)基，只包含多能性干細(xì)胞生長(zhǎng)和擴(kuò)增所必需的八種基本組分。有證據(jù)表明，利用該培養(yǎng)基可維持多種誘導(dǎo)多能性干細(xì)胞系的多能性，支持50代以上的iPSC培養(yǎng)，且細(xì)胞無任何核型異常征象，并可維持iPSC向所有三個(gè)胚系譜系分化的能力。

 

擬胚體形成和分化：Gibco™Essential6™培養(yǎng)基與Essential8培養(yǎng)基結(jié)合使用時(shí)，可支持穩(wěn)定的擬胚體形成。它不包含F(xiàn)GF2，因?yàn)镕GF2會(huì)抑制擬胚體形成和分化，同時(shí)它提供了一種靈活的形式，可以根據(jù)特定應(yīng)用調(diào)整轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β（TGFβ）和堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（FGF2）的水平，以實(shí)現(xiàn)更高效的擬胚體分化。

 

應(yīng)對(duì)高壓力事件：在進(jìn)行單細(xì)胞傳代等高壓力操作時(shí)，可使用Essential8培養(yǎng)基與RevitaCell添加劑組合。RevitaCell添加劑通過更特異性的ROCK抑制劑，能在高難度應(yīng)用中支持細(xì)胞，使應(yīng)激影響最小化，并且與其他ROCK抑制劑不同，它對(duì)下游細(xì)胞應(yīng)用沒有致癮性。

 

從滋養(yǎng)層到無滋養(yǎng)層培養(yǎng)的過渡：Essential8適應(yīng)試劑盒可幫助細(xì)胞從滋養(yǎng)層依賴培養(yǎng)體系適應(yīng)轉(zhuǎn)換至無滋養(yǎng)層培養(yǎng)體系，同時(shí)維持最大的細(xì)胞活力，能在最大限度減少分化的情況下擴(kuò)增細(xì)胞，還可以以單細(xì)胞形式傳代干細(xì)胞系，且對(duì)遺傳穩(wěn)定性沒有影響。

 

實(shí)現(xiàn)周末免飼養(yǎng)培養(yǎng)：使用包含Qkine熱穩(wěn)定FGF2-G3和TGF-β1PLUS生長(zhǎng)因子的E8樣培養(yǎng)基，可在不需要每日更換培養(yǎng)基的情況下對(duì)iPSCs進(jìn)行維持、擴(kuò)增和多能性評(píng)估，實(shí)現(xiàn)了無需周末維護(hù)的培養(yǎng)和擴(kuò)增，同時(shí)保持了細(xì)胞的多能性和增殖潛力。在該培養(yǎng)基中培養(yǎng)了一個(gè)月的iPSC，始終表現(xiàn)出高密度而沒有自發(fā)分化，且通過高水平表達(dá)多能性標(biāo)志物NANOG、SOX2和OCT-4，保持了它們的多能潛力。