96孔培養(yǎng)板廠家教你如何將細(xì)胞混合起來(lái)
閱讀:223 發(fā)布時(shí)間:2022-8-18
96孔培養(yǎng)板在細(xì)胞操作中也嚴(yán)格遵循無(wú)菌原則,操作過(guò)程中要做到規(guī)范、科學(xué),不會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng)。其中最常見(jiàn)的問(wèn)題是如何保證細(xì)胞在加樣后均勻化,并盡量減少換液對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)的影響。請(qǐng)問(wèn)如何將細(xì)胞混合在一起?是滴管吹打還是振蕩培養(yǎng)皿?如果是后一種情況,那么細(xì)胞就會(huì)因?yàn)殡x心力的作用而被甩到周?chē)?,?dǎo)致細(xì)胞越少,細(xì)胞就越多!
這里提供了一個(gè)很好的方法:將培養(yǎng)板放入培養(yǎng)箱中,在培養(yǎng)皿中浸泡幾個(gè)小時(shí),然后將培養(yǎng)皿放入培養(yǎng)皿中,使培養(yǎng)皿內(nèi)的細(xì)胞生長(zhǎng)均勻。記住,不要使用振蕩器振蕩,否則細(xì)胞會(huì)像你所說(shuō)的那樣聚集起來(lái)。
培養(yǎng)板的孔徑越小,這種現(xiàn)象就越明顯,24孔和96孔板是不可避免的,因?yàn)橐后w的附壁使孔內(nèi)培養(yǎng)液不是在液面上,而是像凹鏡一樣高,而使用這兩種孔板,由于需要干預(yù)等原因,不能加足夠的培養(yǎng)液,導(dǎo)致細(xì)胞和培養(yǎng)液一起出現(xiàn)“邊集”現(xiàn)象,如果要在孔中央也有均勻的細(xì)胞,就必須增加接種細(xì)胞的數(shù)量。
在消化細(xì)胞的時(shí)候要注意吹打均勻,避免細(xì)胞成團(tuán),同時(shí)要保證孔內(nèi)培養(yǎng)液的量,一般情況下,接種時(shí)要加足夠的培養(yǎng)液,干預(yù)液和培養(yǎng)液的量等于接種時(shí)培養(yǎng)液的量,這樣就能改變“邊集”現(xiàn)象,值得一試。