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技術(shù)方案 | ELISA 工作流程自動(dòng)化
酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) (Enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA) 是生物技術(shù)和生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域中應(yīng)用廣泛、功能強(qiáng)大的技術(shù)。它能夠使用特異性抗體和酶反應(yīng)來檢測和定量各種分子，如蛋白質(zhì)、肽、抗體和激素等。
ELISA 工作流程通常涉及多個(gè)步驟，包括樣品制備、培養(yǎng)、清洗和檢測，手動(dòng)操作耗時(shí)費(fèi)力，特別是在面對大量檢測樣本時(shí)，手動(dòng)操作的弊端體現(xiàn)的更為明顯。
為了克服這些挑戰(zhàn)，提高酶聯(lián)免疫吸附測定的效率和可靠性，自動(dòng)化已經(jīng)成為一種趨勢，一個(gè)有價(jià)值的工具。
以禽流感 ELISA 檢測為例：
禽流感 (AI) 病毒可影響家禽和野禽，死亡率高，對大型雞群 (例如在家養(yǎng)雞場或大型雞場的雞群) 可能是毀滅性的。
自動(dòng)化禽流感 ELISA 工作流程解決方案
IDEXX 實(shí)驗(yàn)室的 AI MultiS-Screen Ab Test 是一種用于檢測雞、火雞、鴨、鴕鳥和鵝血清樣本中 AI 抗體的篩選試驗(yàn)。他們需要每天對禽群進(jìn)行禽流感病毒常規(guī)篩查，以確保禽群無疾病。如果在禽流感流行期間，檢測量會(huì)大幅增加，需要更多資源。
在這些情況下，分析過程的自動(dòng)化可以節(jié)省時(shí)間和勞動(dòng)力。圖 1 為 IDEXX 實(shí)驗(yàn)室的自動(dòng)化 ELISA 檢測平臺(tái)——將 Agilent BenchCel 微孔板處理器與 Agilent BioTek 406 FX 洗板分液系統(tǒng)和 Cytation 7 細(xì)胞成像多功能微孔板檢測系統(tǒng)集成，提供了自動(dòng)化禽流感 ELISA 工作流程的解決方案。
Figure 1. Agilent BioTek 406 FX washer dispenser, Agilent PlateLoc thermal microplate sealer, Agilent BenchCel microplate handler, and Agilent BioTek Cytation 7 cell imaging multimode reader.
自動(dòng)化禽流感 ELISA 工作流程中液體處理步驟
由集成平臺(tái)左側(cè)的 406 FX 自動(dòng)化洗板分液系統(tǒng)承擔(dān)液體處理工作
Table 1. Reagents and dispensers used for the AIV ELISA
自動(dòng)化禽流感 ELISA 工作流程完整步驟
對 5 塊 96 孔樣品板從孵育到檢測的全自動(dòng)工作流程
Figure 2. IDEXX AI MultiS-Screen Ab Test procedure. Steps performed by theAgilent BenchCel microplate handler, Agilent BioTek 406 FX washer dispenser, and Agilent BioTek Cytation 7 cell imaging multimode reader.
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
使用 Agilent BioTek Gen5 軟件輸出 3 號(hào)板Cutoff (S/N) 示例。在 Gen5 軟件中設(shè)置 Cutoff 標(biāo)準(zhǔn)后，軟件自動(dòng)進(jìn)行數(shù)據(jù)分析并按照設(shè)置要求顯示為陰性 (NEG) 或陽性 (POS) 分析結(jié)果的符號(hào)。
Table 4. Example of plate number 3 data output of cutoff (S/N) symbols using Agilent BioTek Gen5 microplate reader and imager software. Cutoff criteria are programmed in the Gen5 software, allowing automated data analysis and output of interpretation to be viewed as symbols for either negative (NEG) or positive (POS) assay results.
IDEXX AI MultiS-Screen Ab Test workflow 10 塊孔板檢測工作流
Figure 3. IDEXX AI MultiS-Screen Ab Test workflow. Processes performed by the Agilent BenchCel microplate handler, Agilent BioTek 406 FX washer dispenser,and Agilent BioTek Cytation 7 cell imaging multimode reader are depicted in this Gantt chart for a 10-plate run
結(jié)論
自動(dòng)化通過提高效率、準(zhǔn)確性和通量，徹底改變了 ELISA 工作流程。
通過利用機(jī)械手將液體處理設(shè)備、檢測設(shè)備和軟件集成，研究人員可以簡化實(shí)驗(yàn)，最大限度地減少可變性，并生成可靠的數(shù)據(jù)。
使用 Agilent BioTek 406 FX 洗板分液系統(tǒng)、Agilent BenchCel 微孔板處理器和 Agilent BioTek Cytation 7 細(xì)胞成像多功能微孔板檢測系統(tǒng)作為 ELISA 工作流程的自動(dòng)化系統(tǒng)，可以提供一種靈活的解決方案，幫助應(yīng)對增加的檢測通量要求。此外，系統(tǒng)中的三臺(tái)設(shè)備還可以分別獨(dú)立運(yùn)行，靈活應(yīng)用于各種分子和細(xì)胞實(shí)驗(yàn)過程中。
在 ELISA 檢測中使用自動(dòng)化不僅節(jié)省了時(shí)間和資源，而且為加速科學(xué)發(fā)現(xiàn)和推進(jìn)生物醫(yī)學(xué)研究開辟了新的可能性。
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【技術(shù)方案】ELISA 工作流程自動(dòng)化