Droplet-Sequencing

高通量單細胞單分子液滴分選與封裝系統(tǒng)

可實現(xiàn)DNA或細胞封裝和高吞吐量分選。 這使得能夠十分迅速的篩選大型復雜的基因庫。

該系統(tǒng)是一種多功能和用戶友好型皮升級液滴發(fā)生器，觸摸屏化操作，*自動化液滴生成。用于準備DNA，細胞和其他生物材料樣品，然后用于下游的高分辨率分析。 可以安全、快速地將單個分子、DNA文字片段、單個細胞或單個細胞器與生化反應試劑一起封裝在高度穩(wěn)定的雙乳狀或單乳狀液滴中。這些液滴能在PCR、渦旋、孵育和長期儲存過程中保持穩(wěn)定。

封裝液體藥物的系統(tǒng)

采用*專有微流體技術，跨越基因和細胞研究的下一個前沿。它的*設計能幫助研究人員對人類、

動物、植物和微生物的細胞和基因組獲得高分辨率的信息。

可以在用戶友好型的工作流程中生成和分類雙乳液滴，不需要任何使用過熒光細胞分類器的經(jīng)驗。

工作流程從將100 kb的DNA的文字片段、小單細胞或其他生物材料捕捉在高度穩(wěn)定的液滴中開始，以用于諸如PCR和酶活性評價等測試當中。

然后，根據(jù)內含物的熒光對液滴進行分類，分離得到只含有感興趣內容物的液滴，用于下游高分辨率分析，如:

基于微流體，在一個簡單的工作過程中將數(shù)百萬個分子分成液滴，從而能夠高質量地靶向富集大片段(3E100 kb)，

d用于后續(xù)測序 ，允許從幾毫微克的脫氧核糖核酸開始靶向富集長脫氧核糖核酸分子。該系統(tǒng)是基于分離數(shù)百萬個液滴中的長DNA文字片

段，其中含有感興趣目標序列的液滴被熒光標記，并使用流式細胞術進行分類。該系統(tǒng)程序的終產(chǎn)品是可以通過測序研究的長脫氧核糖核酸分子的富集群體。是研究復雜基因組區(qū)域的有效富集技術。

為什么要選擇該系統(tǒng)：

它提供了從大基因文庫中準備基因材料的手段以用于高分辨率的篩查分析。

幫助回答一系列的基因組學和分子生物學問題。

支持合成生物學的工作流程，如酶進化及其路徑工程。
具有用戶友好型接口，具有將微液體技術接入各實驗室的能力

Droplet-Sequencing    階段劃分液滴系統(tǒng)

典型應用：

與適當?shù)囊旱畏蛛x、測序和分析技術相結合，該系統(tǒng)可應用于以下等幾個方面：

●長或短讀測序

●基因編輯分析

●無偏全基因組擴增

●酶活性評價

近年來，液滴的質譜分析技術、基于液滴的梯度技術、雙重液滴技術及基于液滴的基因篩選等取得了較大進展，使液滴微流控在單細胞分析、酶動力學、蛋白質合成及高通量篩選等研究領域的潛力逐漸顯現(xiàn)出來。

實現(xiàn)單分子或單細胞分辨率

確保您為單分子或單細胞分析捕獲了正確的材料。該系統(tǒng)通過將生命的構建模塊封裝在微微升雙乳液或單乳液液滴中，支持高分辨率的基因組學、宏基因組學和分子生物學工作流程。這種*的方法使以前未知的基因組區(qū)域可用于長讀和短讀測序，提高了全基因組擴增的分辨率，支持單細胞酶活性的評估等等。

1、基因組學應用

提高基因組學和宏基因組學研究的分辨率。使用我們系統(tǒng)以及測序建議和生物信息學工具來執(zhí)行一系列基因組學工作流程該系統(tǒng)在人類、其他動物、植物和微生物DNA的長讀和短讀測序工作流程中證明了其性能。

聚光燈:植物基因組學

克服對植物龐大而復雜的基因組進行測序的挑戰(zhàn)。該系統(tǒng)在支持各種植物基因組學工作方面表現(xiàn)出色，包括:

• 特征不明顯的基因簇分析

• 由于參考基因組和植物品種之間的低對應性導致的間隙閉合

• 植物基因組結構重排的解析

• 生物合成基因簇的檢查

2、基于細胞的應用

新應用

流動聚焦幾何形狀的一個特征在于在微流體液滴形成期間可以觀察到兩相不混溶流體的變化，從而可以獲得各種微流體液滴的大小，并且可以看到存在沒有液滴形成的區(qū)域[8]。與T型結形狀不同，流動聚焦幾何形狀產(chǎn)生的液滴沒有簡單的模型根據(jù)控制參數(shù)來預測微流體液滴的尺寸。另一方面，微流體液滴的產(chǎn)生頻率通常相對較高，在kHz量級。然而，將jetting打破形成液滴通常會涉及到形成第二微流體液滴，其尺寸遠低于主液滴尺寸，這種情況下產(chǎn)生的微液滴非常的不穩(wěn)定，液滴尺寸難以控制。

與傳統(tǒng)qpcr技術相比，數(shù)字pcr技術具有*的靈敏度、特異性和性，但截止目前而言，數(shù)字pcr仍然是一種全新的檢測方法，是一種全新的技術思路和手段。數(shù)字pcr技術相關的儀器、耗材、試劑和方法的開發(fā)與創(chuàng)新，將具有無有止境的空間。但目前數(shù)字pcr技術的應用成本相對較高，耗材使用不方便，導致數(shù)字pcr設備推廣速度較慢。數(shù)字pcr試劑體系封閉，導致基于該體系的試劑開發(fā)和優(yōu)化嚴重受到制約。尤其是目前商品化的數(shù)字pcr試劑均存在一些問題，如芯片式數(shù)字pcr的試劑不適用于微滴式數(shù)字pcr設備，只適用于科研實驗室進行低通量數(shù)字pcr實驗，不適合臨床檢測體系的開發(fā)，也不適合用于基因突變檢測試劑盒的開發(fā)；又如微滴式數(shù)字pcr儀目前只有bio-rad和raindance兩家，其中bio-rad的試劑采用封閉式系統(tǒng)(封閉的pcrmix體系及配套封閉的dropletoil體系，不允許用戶更改配方以獲得相應的kit)，而raindance則采用開放式系統(tǒng)(兼容的qpcrmix和第三方采購的dropletoil)，但qpcrmix并不針對數(shù)字pcr進行優(yōu)化，會導致“rain"效應，即二維散點彌散，尤其是在raindance的微滴數(shù)達到千萬的級別的情況下，rain效應將嚴重干擾數(shù)據(jù)的正常分析。