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嬰幼兒奶粉中營養(yǎng)強(qiáng)化劑低聚半乳糖的檢測(cè)方案（離子色譜）
離子色譜儀檢測(cè)嬰幼兒奶粉中營養(yǎng)強(qiáng)化劑低聚半乳糖的含量
低聚半乳糖是一種具有天然屬性的功能性低聚糖，在自然界中，動(dòng)物的乳汁中存在微量的GOS，而人母乳中含量較多，低聚半乳糖是人體腸道中雙歧桿菌、嗜酸乳酸桿菌等有益菌*的營養(yǎng)源和有效的增殖因子，可以改善人體腸道的消化吸收功能。
新生兒的消化功能比較薄弱，嬰兒體內(nèi)的雙歧桿菌菌群的建立很大程度上依賴母乳中的GOS成分。所以嬰幼兒奶粉中都添加了低聚半乳糖的營養(yǎng)成分。中華人民共和國衛(wèi)生部2008年第20號(hào)公告批準(zhǔn)低聚半乳糖為新資源食品，并規(guī)定了相應(yīng)的使用標(biāo)準(zhǔn)。
南京科捷用磷酸鹽緩沖液提取試樣中游離的低聚半乳糖和乳糖，采用半乳糖苷酶將提取液中低聚半乳糖的乳糖酶解，將提取的初始溶液和酶處理過的溶液分別用于離子色譜儀測(cè)定。
*步測(cè)定初始溶液中游離的半乳糖和乳糖，第二步測(cè)定從低聚半乳糖和乳糖中釋放出的半乳糖總量。利用乳糖和半乳糖的含量計(jì)算試樣中低聚半乳糖的含量。
實(shí)驗(yàn)儀器
離子色譜儀IC-600（南京科捷分析儀器有限公司）采用了全塑料流路設(shè)計(jì)，泵頭，流路等使用PEEK制造，能使用強(qiáng)酸，強(qiáng)堿的淋洗液，可跟的有機(jī)溶劑兼容，方便用戶對(duì)復(fù)雜樣品進(jìn)行檢測(cè)后進(jìn)行沖洗和維護(hù)。設(shè)計(jì)緊湊，合理，特大LCD液晶顯示屏，具有常規(guī)檢測(cè)和高精檢測(cè)兩種檢測(cè)模式，*的數(shù)字式控溫電導(dǎo)檢測(cè)器。
酶解試樣前處理
1、吸取制備的試樣液10mL，移入100mL容量瓶中，標(biāo)記為A1，吸取1mLβ-半乳糖苷酶溶液，放入A1中，用鋁箔紙密閉搖勻；同時(shí)做酶試劑空白A0。
2、將含有活性酶A1和A0的兩個(gè)100mL容量瓶在（60±2）℃水浴中持續(xù)溫和振搖60min（從混合物溫度達(dá)到60℃開始計(jì)算時(shí)間，振搖過程中避免形成水沫或空氣泡沫），然后將A0和A1兩個(gè)處理溶液，用冰浴冷卻至室溫，向A1，A0兩個(gè)100mL容量瓶中各加入20%乙腈溶液5mL，用水定容，混勻。
3、分別取適量上述處理后溶液至離心管中，10000r/min離心10min，上層水相用0.2μm濾膜過濾，用離子色譜儀測(cè)定。
色譜參考條件
色譜柱 | PA20陰離子交換色譜柱（150mm×3mm，顆粒3.5μm）, 保護(hù)柱（30mm×3mm）或等效色譜柱 |
柱溫 | 30℃ |
流動(dòng)相流速 | 0.4mL/min |
進(jìn)樣量 | 20μL |
檢測(cè)器 | 脈沖安培檢測(cè)器 |