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液相色譜法測定食品中的葉酸
葉酸是一種重要的B族維生素,是體內生化反應中一碳單位轉移酶系的輔酶,起一碳單位傳遞體的作用,與許多重要的生化過程密切相關。葉酸缺乏會引起巨幼紅細胞性貧血、高同型半胱氨酸血癥,后者被認為是心血管疾病的獨立危險因素。孕婦缺乏葉酸是引起胎兒神經(jīng)管畸形的主要原因,且會出現(xiàn)先兆子癇,胎盤早剝發(fā)生率增高。許多研究證實了葉酸與新生兒缺陷、成年與老年心血管病、精神科疾病、胃腸功能異常、免疫學缺陷及腫瘤等具有相關性。
葉酸廣泛存在于各種動植物食品中,但天然食物所含葉酸大部分以多谷氨酸葉酸的形式存在,且含量不高。美國1998年1月1日起已強制規(guī)定在某些谷物食品中強化葉酸,F(xiàn)DA規(guī)定1000g谷物食品(如面包、面粉、早餐谷物、大米等)強化1.4mg葉酸。我國已在嬰幼兒、老年食品中強化葉酸。但由于缺少快速檢測方法,因而一般實驗室還未開展葉酸含量的測定。因此,建立簡單、快速、準確的測定各種食物尤其是嬰幼兒、孕婦強化食品及老年食品中的葉酸含量有重要的現(xiàn)實意義。文中用液相柱后衍生法建立一個適用于天然或強化食品中葉酸定量檢測的快速、簡便、準確的方法。
儀器準備
儀器簡介
LC-600A智能全控液相色譜系統(tǒng)由P600高壓恒流泵與UV600紫外檢測器直接構成等度分析系統(tǒng)。使用WS600工作站可以同時控制數(shù)臺P600高壓恒流泵、UV600紫外檢測器及恒溫柱箱等,實行多元高壓洗脫、波長掃描等功能。
應用領域
化合物檢測、法醫(yī)毒物分析、蛋白質組學食品檢測、藥物分析、環(huán)境分析、聚合物分析
樣品處理:
準確稱取5-10g樣品(內含葉酸5μg以上)于50mL容量瓶中,固體或半固體樣品用搗碎機搗碎后再稱樣,加水溶解,混勻并用超聲波振蕩10min。
色譜條件:
流動相 | 含體積分數(shù)12%乙腈的50mmol/L KH2 PO4溶液 |
流速 | 1mL/min |
柱溫 | 40℃ |
激發(fā)波長 | 365nm |
發(fā)射波長 | 450nm |
測定結果: