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液相色譜法測(cè)定人血漿中齊留通
齊留通是一種在體內(nèi)和體外有效的選擇性5.脂氧合酶抑制劑，臨床應(yīng)用為其外消旋體。由美國(guó)公司研制開發(fā)，1997年3月在美國(guó)上市。齊留通可以直接抑制5.脂氧合酶的活性，減少白三烯的合成，從而減輕支氣管內(nèi)炎癥，降低氣道反應(yīng)性，達(dá)到控制哮喘發(fā)作的治療目的。
為研究齊留通在中國(guó)健康志愿者體內(nèi)的藥物動(dòng)力學(xué)，需要建立靈敏可靠的生物樣品的分析方法。國(guó)外有文獻(xiàn)采用HPLC-UV法測(cè)定生物樣品齊留通濃度，其定量限均可達(dá)到0.01mg/L，但血漿樣品的處理采用固相萃取。
血漿樣品經(jīng)液液萃取的齊留通HPLC-UV血藥濃度測(cè)定法，定量限為0.0781mg/L。該法準(zhǔn)確+靈敏且回收率高，可用于齊留通臨床血藥濃度的監(jiān)測(cè)、藥物動(dòng)力學(xué)和生物利用度研究。
檢測(cè)儀器：液相色譜儀，工作站，臺(tái)式高速離心機(jī)，微量旋渦混合儀。
色譜條件：流動(dòng)相：磷酸二氫鈉（20mmol/L，pH4.0左右）-乙腈-四氫呋喃（75:25:5）流速1.5ml/min；柱溫35℃；檢測(cè)波長(zhǎng)260nm。
測(cè)定方法：精密稱取齊留通和乙酰苯胺適量，以甲醇分別配成1000mg/L"齊留通的對(duì)照儲(chǔ)備液和64mg/L的內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液。用蒸餾水稀釋儲(chǔ)備液得到相應(yīng)濃度的工作溶液，置0℃冰箱保存待用。
取血漿樣品0.5mL，加入乙酰苯胺溶液（64mg/L）50µL，混勻。加入二氯甲烷-無(wú)水乙醇（9:1）6mL，旋渦混勻2min，2500r/min離心5min，取下清液，置35℃水浴中氮?dú)獯蹈?。殘?jiān)眉状?水（1:1）100µL溶解，進(jìn)樣20µL，記錄色譜圖及峰面積。以齊留通的峰面積與內(nèi)標(biāo)峰面積的比值定量。