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Cyanine5.5 maleimide

MCE 國(guó)際站：Cyanine5.5 maleimide chloride

品牌：MedChemExpress (MCE)

貨號(hào)：HY-D1323

CAS：2409591-45-1

Synonyms：Cy5.5 maleimide chloride

純度：97.88%

存儲(chǔ)條件：-20°C, sealed storage, away from moisture and light *In solvent : -80°C, 6 months; -20°C, 1 month (sealed storage, away from moisture and light)

運(yùn)輸條件：美國(guó)大陸的室溫；其他地方可能有所不同。

產(chǎn)品活性：Cyanine5.5 maleimide chloride 是一種 CY 染料。CY 為花菁 (Cyanine) 的縮寫(xiě)，是由奇數(shù)個(gè)甲基單位連接的兩個(gè)氮原子組成的化合物。菁類(lèi)化合物具有波長(zhǎng)長(zhǎng)、吸收和發(fā)射可調(diào)、消光系數(shù)高、水溶性好、合成相對(duì)簡(jiǎn)單等特點(diǎn)。CY 系類(lèi)染料常被用于蛋白，抗體以及小分子化合物的標(biāo)記，對(duì)于蛋白抗體的標(biāo)記，可以通過(guò)簡(jiǎn)單的混合反應(yīng)來(lái)完成結(jié)合，以下我們介紹了蛋白抗體標(biāo)記的標(biāo)記方法，具有一定的參考意義。

生物活性： Cyanine5.5 maleimide (Cy5.5 maleimide) chloride 是一種有效的熒光染料。 Cyanine5.5 馬來(lái)酰亞胺可用作蛋白質(zhì)染料^[1]。

體外：原液制備1. 蛋白準(zhǔn)備為了獲得優(yōu)良標(biāo)記效果，請(qǐng)將蛋白 (抗體) 濃度配制為 2 mg/mL。1) 蛋白溶液 pH 值應(yīng)為 8.5±0.5，若 pH 低于 8.0，則用 1 M 碳酸氫鈉進(jìn)行調(diào)整。2) 若蛋白濃度低于 2 mg/mL，標(biāo)記效率會(huì)大大降低，為了獲得優(yōu)良標(biāo)記效率，建議最終蛋白質(zhì)濃度范圍為 2-10 mg/mL。3) 蛋白必須在不含伯胺 (如 Tris 或甘氨酸) 和銨離子的緩沖液中，否則會(huì)影響標(biāo)記效率。2. 染料準(zhǔn)備將無(wú)水 DMSO 稀釋 CY 染料，制成 10 mM 儲(chǔ)備溶液。通過(guò)玻璃管或旋渦充分混合。注：CY 儲(chǔ)存液建議分裝后于 -20 ℃ 或 -80 ℃ 避光保存。3. 染料工作液用量計(jì)算標(biāo)記反應(yīng)所需的 CY 染料用量取決于要標(biāo)記蛋白的用量，CY 染料與蛋白的優(yōu)良摩爾比為 10 左右。例：假如所需標(biāo)記蛋白為 500 μL 2 mg/mL 的 IgG (MW=150,000),用 100 μL DMSO 溶解一管 1 mg CY 染料，則所需 CY 體積為 3.95 μL，詳細(xì)計(jì)算流程如下 (以 CY3-NHS ester 為例) ：1) mmol (IgG) = mg/mL (IgG) ×mL (IgG) / MW (IgG) =2 mg/mL×0.5 mL / 150,000 mg/mmol= 6.7×10-6 mmol2) mmol (CY3-NHS ester) = mmol (IgG) ×10 =6.7×10-6 mmol×10 = 6.7×10-5 mmol3) μL (CY3-NHS ester) = mmol (CY3-NHS ester) ×MW (CY3-NHS ester) / mg/μL (CY3-NHS ester) = 6.7×10-5 mmol× 590.15 mg/mmol / 0.01 mg/μL =3.95 μL (CY3-NHS ester) 使用方法1. 標(biāo)記反應(yīng)1) 取算好體積的新鮮配制的 10 mg/mL CY 染料緩慢加入到 0.5 mL 蛋白樣品溶液中，輕輕搖勻混合，然后短暫離心將樣品收集在反應(yīng)管底部。切忌劇烈混勻，防止蛋白樣品變性失活。2) 將該反應(yīng)小管置于避光處，在室溫條件下輕輕搖晃孵育 60 分鐘，每隔 10–15 分鐘，將反應(yīng)小管輕輕顛倒幾次，以充分混合兩種反應(yīng)物，提高標(biāo)記效率。2. 蛋白純化脫鹽以下方案是使用 SepHadex G-25 柱純化染料蛋白偶聯(lián)物為例。1) 按照生產(chǎn)說(shuō)明書(shū)制備 SepHadex G-25 柱。2) 將反應(yīng)混合物裝入 SepHadex G-25 色譜柱頂部。3) 當(dāng)樣品運(yùn)行到頂部樹(shù)脂表面下方時(shí)，立即加入 PBS (pH 7.2-7.4)。4) 向所需樣品中加入更多的 PBS (pH 7.2-7.4),完成柱純化。結(jié)合含有所需要的染料-蛋白質(zhì)綴合物的組分。 MCE尚未獨(dú)立證實(shí)這些方法的準(zhǔn)確性。僅供參考。

Emission (Em)：710

Excitation (Ex)：680

銷(xiāo)售產(chǎn)品：Clavulanic acid  | (S)-Higenamine (hydrobromide)  | ReACp53  | TASK-1-IN-1  | Oxiconazole nitrate  | Hernandezine  | Pafuramidine  | RG7112  | Myristic acid  | Aminopterin

Trending products：Recombinant Proteins  |  Bioactive Screening Libraries  |  Natural Products  |  Fluorescent Dye  |  PROTAC  |  Isotope-Labeled Compounds  |  Oligonucleotides

參考文獻(xiàn)：

[1]. Masarapu H, et al. Physalis Mottle Virus-Like Particles as Nanocarriers for Imaging Reagents and Drugs. Biomacromolecules. 2017 Dec 11;18(12):4141-4153.
[2]. Ptaszek M. Rational design of fluorophores for in vivo applications. Prog Mol Biol Transl Sci. 2013;113:59-108.
[3]. Shindy, H. A. (2017). Fundamentals in the chemistry of cyanine dyes: A review. Dyes and Pigments, 145, 505–513. doi:10.1016/j.dyepig.2017.06.029