羅丹明-刀豆球蛋白A(Rhodamine-labeled Concanavalin A,簡稱RPE),也被稱為羅丹明標記刀豆球蛋白A、Concanavalin A-RB或Rh-Con A,是一種重要的熒光標記復合物。以下是對其的詳細介紹:
羅丹明-刀豆球蛋白A由羅丹明分子和刀豆球蛋白A(Concanavalin A,Con A)通過共價鍵結合而成。其中,羅丹明是一種熒光染料,而刀豆球蛋白A則是一種從刀豆中提取的儲存蛋白。
熒光特性:
羅丹明是一種常用的熒光染料,其熒光強度高、穩(wěn)定性好,激發(fā)波長約為550nm,發(fā)射波長約為570nm。
在特定波長光的激發(fā)下,羅丹明-刀豆球蛋白A能夠發(fā)出明亮的熒光信號,便于在熒光顯微鏡和流式細胞儀等儀器中進行檢測。
親和性:
刀豆球蛋白A具有對附著于多糖的α-D-葡萄糖(α-D-GLC)和α-D-甘露糖(α-D-MAN)結合的親和性。
因此,羅丹明-刀豆球蛋白A能夠選擇性地與這些糖類結合,用于研究細胞表面的糖基化程度和類型。
穩(wěn)定性:
羅丹明標記的刀豆球蛋白A具有較高的化學穩(wěn)定性,能夠在各種實驗條件下保持其活性,從而確保實驗結果的準確性。
通常是將羅丹明羧酸甲酯與刀豆球蛋白A進行共價偶聯(lián)反應,制備出熒光標記的蛋白。常用的偶聯(lián)方法包括活性酯法、馬來酰亞胺法等,以確保標記的特異性和效率。反應后,通過透析、高效液相色譜(HPLC)或凝膠過濾等方法純化產物,去除未反應的組分。使用質譜(MS)和核磁共振(NMR)等技術進行表征,以確認標記的成功和化合物的結構。
細胞成像:
利用羅丹明-刀豆球蛋白A的熒光特性和親和性,可以用于細胞成像,觀察細胞表面或內部的糖基化分布。這對于研究細胞表面的糖鏈結構和功能具有重要意義。
糖基化分析:
在生物化學研究中,羅丹明-刀豆球蛋白A可用于分析樣品中的糖基化程度和類型。通過檢測其與糖類的結合情況,可以推斷出樣品中糖基的種類和數(shù)量。
藥物篩選:
通過羅丹明-刀豆球蛋白A的特異性結合能力,可以篩選出與特定糖類結合的潛在藥物。這對于藥物研發(fā)和疾病治療具有重要意義。
營養(yǎng)學研究:
羅丹明-刀豆球蛋白A可以用于追蹤蛋白質在動物體內的吸收和利用情況,評估其營養(yǎng)價值。
免疫學應用:
可以用作抗體標記物,應用于免疫熒光、ELISA等實驗,以檢測與刀豆球蛋白A相關的特定生物分子。
產品規(guī)格:羅丹明-刀豆球蛋白A通常以固體或粉末的形式存在,規(guī)格可能有1mg、5mg、10mg等不同選項。
儲存條件:為確保其穩(wěn)定性和活性,羅丹明-刀豆球蛋白A通常需要在冷藏條件下(-20℃)儲存,并避免頻繁解凍和冷凍。取用時應緩慢恢復至室溫,并在充入惰性氣體后冷凍保存。
在使用過程中,應注意避免與強酸、強堿等化學物質接觸,以免影響其熒光性能和結合能力。此外,還應遵循相應的實驗操作規(guī)程,以確保實驗的準確性和安全性。
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