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包涵體蛋白表達
  • 包涵體蛋白表達
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貨物所在地:江蘇蘇州市

更新時間:2025-06-26 16:43:08

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包涵體蛋白表達是一種在基因工程中常見的現象,主要發(fā)生在外源基因在原核細胞,尤其是大腸桿菌中高效表達時。在這種情況下,重組蛋白形成的是由膜包裹的高密度(1.3 mg/ml)不溶性蛋白質顆粒,這些顆粒在顯微鏡下觀察時為高折射區(qū),與胞質中其他成分有明顯區(qū)別。

包涵體蛋白表達是一種在基因工程中常見的現象,主要發(fā)生在外源基因在原核細胞,尤其是大腸桿菌中高效表達時。在這種情況下,重組蛋白形成的是由膜包裹的高密度(1.3 mg/ml)不溶性蛋白質顆粒,這些顆粒在顯微鏡下觀察時為高折射區(qū),與胞質中其他成分有明顯區(qū)別。

包涵體的形成可能與多種因素有關,包括蛋白表達量過高、氨基酸組成、所處的環(huán)境以及蛋白的來源等。例如,當蛋白合成速度過快時,可能導致蛋白沒有足夠的時間進行正確的折疊,二硫鍵不能正確配對,進而導致蛋白質無法達到足夠的溶解度,最終形成包涵體。

由于包涵體中的蛋白是非折疊狀態(tài)的聚集體,因此不具有生物學活性。為了獲得具有生物學活性的蛋白質,包涵體的純化和復性過程至關重要。包涵體的純化主要包括樣本破碎、洗滌、溶解、復性、純化以及鑒定幾個步驟。其中,復性是一個非常復雜的過程,常用的復性方法包括稀釋復性、透析復性、凝膠過濾層析和離子交換層析等。

產品簡介

您是否厭倦了花費數天時間進行轉化以及精細的細胞培養(yǎng)以獲得您感興趣的蛋白質?在這個時間就是金錢的快節(jié)奏世界中,您是否正在尋找具有成本效益的蛋白質生產平臺? 與傳統(tǒng)的基于細胞的方法相比,無細胞蛋白表達是加速您的研究開發(fā)的優(yōu)質解決方案,使您節(jié)約控制成本并靈活調控反應參數,以更快、更有效方式的獲得目的蛋白產物。

“無細胞蛋白表達技術提供的純化蛋白質,在數量和速度上都超過常規(guī)方法。表達的每一種蛋白質都可以是一種治療候選物,并且可以使我們比以往快2個月生成數據包,同時節(jié)省資金。通過繼續(xù)使用無細胞蛋白技術,我們預期將可以在未來18個月內,節(jié)省一名全職員工約6個月的時間。” ——國外客戶對無細胞蛋白表達技術的評價。

PLD無細胞蛋白表達試劑盒依賴T7轉錄和大腸桿菌內源性翻譯機制。反應體系包含轉錄、翻譯、蛋白質折疊和能量再生所需的所有生物成分,例如核糖體、tRNA、分子伴侶、代謝酶、翻譯起始和延伸因子,試劑盒能夠以PCR產物、環(huán)狀質粒為模板,您只需將模板添加到其中即可實現目的蛋白質的快速、高效表達。

產品特色

PLD無細胞蛋白表達試劑盒(標準版)

快速:最快1小時即可檢測到目的蛋白,10小時蛋白合成達到峰值;

PLD無細胞蛋白表達試劑盒(標準版)

模板靈活:支持質粒模板以及PCR模板*;

PLD無細胞蛋白表達試劑盒(標準版)

表達量高:最高可實現3mg/mL以上產率的蛋白制備;

PLD無細胞蛋白表達試劑盒(標準版)

適用蛋白種類多:可表達各種類型的蛋白,包括富含二硫鍵的蛋白、膜蛋白等。

PLD無細胞蛋白表達試劑盒(標準版)

操作簡單:一步反應,僅需將反應組分與DNA模板混合即可制備蛋白;

PLD無細胞蛋白表達試劑盒(標準版)

高通量:可在96孔板中進行表達篩選,當檢測到陽性表達后,可進行體系放大;

PLD無細胞蛋白表達試劑盒(標準版)

蛋白共表達:可在同一反應中,同時表達多種蛋白;

 

產品組成

PLD無細胞蛋白表達試劑盒提供一種制備重組蛋白的方法,可輕松進行檢測和純化。該試劑盒提供的表達系統(tǒng)主要包含:

1、優(yōu)化的大腸桿菌提取物,增加了DNA轉錄和翻譯過程中結構的穩(wěn)定性,增加可溶性蛋白的產量;

2、優(yōu)化的反應緩沖液,通過ATP再生系統(tǒng)持續(xù)為蛋白質合成提供能量;

3、優(yōu)化濃度比例的氨基酸,為蛋白質合成提供充足的底物供應;

4、含GFP基因的優(yōu)化表達載體,GFP作為陽性對照可以直觀觀測蛋白表達結果。

產品應用

PLD無細胞蛋白表達試劑盒可用于但不限于以下場景:

① 抗體發(fā)現與驗證

② 高通量篩選

案例數據

PLD無細胞蛋白表達試劑盒(標準版)

產品售價

名稱

貨號

規(guī)格*

目錄價

適用場景

PLD無細胞蛋白表達試劑盒(標準版)

PLDK001

1ml

¥2120

大多數蛋白包括抗體、酶

PLD無細胞蛋白表達試劑盒(標準版)

PLDK001

10ml

¥15900

PLD無細胞蛋白表達試劑盒(增強版)

PLDK002

1ml

¥3050

絕大多數蛋白,包括膜蛋白、全長抗體

PLD無細胞蛋白表達試劑盒(增強版)

PLDK002

10ml

¥25200

PLD無細胞蛋白表達試劑盒(全長抗體版)

AB01

1ml

¥2440

全長IgG抗體、Fab抗體、抗體高通量篩選

PLD無細胞蛋白表達試劑盒(全長抗體版)

AB01

10ml

¥20160

PLD無細胞蛋白表達試劑盒(高通量版)

HTE01-050

50ml

¥16667

高通量篩選

PLD無細胞蛋白表達試劑盒(高通量版)

HTE01-050

1000ml

¥100000

其他規(guī)格 (20ml 、50ml、100ml、1000ml....)

詢價

 

 

產品性能

試劑型號

線性模板支持

二硫鍵支持

產量

體系耐受性

通用性

PLDK001

★★★★

★★★

★★★★

PLDK002

★★★★★

★★★★★

★★★★★

PLD-AB01

★★★★

★★★

★★★

HTE01

★★★

★★★

★★★

產品清單

試劑 包裝 運輸 儲存
體積 1 mL 10 mL 50 mL 干冰運輸 -80℃
組分A 20 rxns* 200  rxns 1000 rxns
組分B 20 rxns 200  rxns 1000 rxns
陽性對照質粒(PC) 4 μg 10 μg 20 μg

*無細胞終反應體積按照50 μL/rxn計算。

反應體系參考

反應體系可根據實際需要按比例放大或縮小

 

試劑 用量
組分A 20.5 μL
組分B 16.7 μL
DNA模板 終濃度20 ng/μL
ddH20 補至50 μL
總反應體積 50μL

 

 

推薦反應體積及對應反應容器

   
反應體積 反應容器
50 μL 96孔板
100 μL 48孔板
200-300 μL 24孔板
500-1000 μL
 
6孔板

 

 

 

 

 

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