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當(dāng)前位置:天津德伯科技有限公司>>技術(shù)文章>>大小鼠COPD熏煙造模方法的經(jīng)驗(yàn)小結(jié)
近年來,由于空氣環(huán)境,吸煙,用藥等各種因素原因?qū)е履壳霸谖覈宰枞苑渭膊?COPD,即慢阻肺)成為一種常見、多發(fā)、高致殘率和高致死率慢性呼吸系統(tǒng)疾病,它的發(fā)生與肺部對有害氣體或顆粒氣溶膠的異常炎癥反應(yīng)有關(guān)。慢阻肺的特征是慢性氣道炎癥,黏液高分泌、氣道重塑,和肺氣腫,隨著病情反復(fù)發(fā)作、急性加重,導(dǎo)致肺功能逐漸下降呼吸困難。在研究慢阻肺的形成,發(fā)展以及治療和有效預(yù)防中,建立理想的實(shí)驗(yàn)動物模型是極其重要的基礎(chǔ)和條件。
目前COPD動物造模的方法中,熏煙實(shí)驗(yàn)即采用長時(shí)間香煙煙氣對動物進(jìn)行暴露的方法被證明為比較理想的方法。根據(jù)我們多年來接觸的不同實(shí)驗(yàn)方法分類總結(jié)一下經(jīng)驗(yàn):
一. 經(jīng)典的實(shí)驗(yàn)方案:
實(shí)驗(yàn)動物 | 小鼠(或大鼠) |
實(shí)驗(yàn)設(shè)備 | 動物COPD熏煙造模系統(tǒng)(如德伯科技CAMP-AFW系統(tǒng)) |
熏煙周期 | 6個(gè)月 |
熏煙時(shí)間 | 每天兩次,兩次間間隔4個(gè)小時(shí)以上,每周至少5天 |
單次熏煙 | 每次1小時(shí) |
用煙數(shù)量 | 符合ISO/CIR標(biāo)準(zhǔn)的煙氣條件下每次不少于1根香煙/動物 |
煙氣濃度 | 不小于350mg/m3(PM表征條件下) |
注:符合ISO/CIR標(biāo)準(zhǔn)的煙氣需要專業(yè)的香煙抽煙機(jī)器人或香煙發(fā)生器實(shí)現(xiàn),市售線性煙氣發(fā)生器發(fā)生的煙氣濃度往往過大,需和ISO/CIR標(biāo)準(zhǔn)的煙氣做校準(zhǔn)后方有參考意義。
二. 急性造模方案:
實(shí)驗(yàn)動物 | 小鼠(或大鼠) |
實(shí)驗(yàn)設(shè)備 | 動物COPD熏煙造模系統(tǒng)(如德伯科技CAMP-AFW系統(tǒng)) |
熏煙周期 | <2月 |
熏煙時(shí)間 | 每天兩次,兩次間間隔4個(gè)小時(shí)以上,每周至少5天 |
單次熏煙 | 每次1小時(shí) |
用煙數(shù)量 | 符合ISO/CIR標(biāo)準(zhǔn)的煙氣條件下每次不少于1根香煙/動物 |
煙氣濃度 | 不小于350mg/m3(PM表征條件下) |
LPS注射 | 在第15天,第45天分布注射一次LPS,總次數(shù)不得超過兩次 |
注:增加了LPS注射會大大縮短熏煙造模周期,但會提高動物死亡率,特別是小鼠。
熏煙造模結(jié)果評價(jià):
僅熏煙造模時(shí)對照組動物幾乎無死亡且呼吸均勻,毛發(fā)光澤,食量及活動正常。增加LPS注射時(shí)會造成動物有死亡情況。
造模組動物觀察結(jié)果多為:陸續(xù)出現(xiàn)流鼻涕、打噴嚏、咳嗽、眼角有血樣分泌物、呼吸有啰音、毛色枯黃無光澤等現(xiàn)象。甚至部分有脫毛現(xiàn)象,躁動,倦怠蜷縮,腹部脹大,出現(xiàn)點(diǎn)頭運(yùn)動,甚者張口呼吸等明顯癥狀。病理結(jié)果為:顯示柱狀細(xì)胞增加,炎癥細(xì)胞浸潤。
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