抗體保存及運(yùn)輸指南
抗體保存與運(yùn)輸?shù)卯?dāng)與否,直接決定了抗體的活性和使用效果!如果抗體保存得當(dāng),大部分抗體活性都可以維持?jǐn)?shù)月甚至數(shù)年。
本指南以abcam抗體保存方法為主,同樣也可以應(yīng)用到其他絕大部分公司的抗體產(chǎn)品!
請(qǐng)謹(jǐn)記!無(wú)論何時(shí)
請(qǐng)按照說(shuō)明書推薦的保存條件正確保存抗體!
1. 收到抗體后請(qǐng)務(wù)必在12000rpm離心1分鐘后再打開(kāi)管蓋進(jìn)行分裝和保存(如果抗體體積小于50ul,請(qǐng)延長(zhǎng)離心時(shí)間至5分鐘,以保證全部抗體均離心下來(lái))!
Abcam的抗體使用非常特殊的儲(chǔ)存管,只有在12000rpm離心1分鐘才能將附著在管壁或蓋內(nèi)的抗體全部離心下來(lái)。即使是在10000rpm離心也會(huì)導(dǎo)致離心不完整,導(dǎo)致出現(xiàn)抗體的量不足的現(xiàn)象!
2. 對(duì)于abcam大部分抗體,比較合適的保存方式是分裝后保存在 -20oC or -80oC 。
o 對(duì)絕大多數(shù)抗體來(lái)說(shuō),保存在-20oC是足夠了。沒(méi)有任何證據(jù)顯示保存在-80oC 會(huì)有更多的好處!
o 分裝可以大程度的降低反復(fù)凍融對(duì)抗體活性的損害,同時(shí)也降低了由于多次從同一管中吸取抗體造成的污染可能性。
o 分裝的量以一次實(shí)驗(yàn)用完為好,最少不能少于10ul每份。因?yàn)榉盅b體積越小,抗體的濃度越可能會(huì)受到蒸發(fā)以及管壁吸附的影響
o 復(fù)融后的分裝抗體如果一次用不完,將剩余母液保存在4oC,避免再凍起來(lái)!
o 抗體工作液應(yīng)該當(dāng)天配制當(dāng)天用完,在4oC 盡量不要超過(guò)1天。
o 避免將抗體保存在自動(dòng)除霜冰箱中。盡量將抗體保存在冰箱里層,而不是門上
3. 大部分抗體收到后4oC短暫保存1-2周對(duì)抗體活性是沒(méi)有影響的。
如果抗體很快(1-2周)會(huì)使用,推薦在4oC保存,這是為了避免反復(fù)凍融對(duì)抗體活性的損害。如果要長(zhǎng)期保存則最好是在-20oC or -80oC。最關(guān)鍵的一點(diǎn)是要根據(jù)說(shuō)明書推薦的方式來(lái)正確的保存抗體!
但是,腹水形式的產(chǎn)品請(qǐng)?jiān)谑盏胶罅⒓磧銎饋?lái)!因?yàn)樵擃惍a(chǎn)品含有大量的蛋白酶,長(zhǎng)期在4oC保存會(huì)導(dǎo)致抗體的降解!
4. 大部分抗體的運(yùn)輸條件:一般的運(yùn)輸過(guò)程需要3-4周的時(shí)間,所以是在4oC的條件下來(lái)完成的。
4oC運(yùn)輸最主要的目的是為了避免反復(fù)凍融對(duì)抗體活性的損害(如果使用干冰運(yùn)輸,那么收到時(shí)抗體是凍起來(lái)的,為了分裝就需要解凍。這就多了一次凍融的過(guò)程)。所以運(yùn)輸過(guò)程中避免干冰運(yùn)輸!
特殊抗體的保存條件:
· 酶聯(lián)抗體:永遠(yuǎn)保存在4oC,避免凍起來(lái)。否則會(huì)導(dǎo)致酶活性的下降或者喪失
· 偶聯(lián)抗體:所有偶聯(lián)抗體都是在棕色管中或使用錫箔紙避光保存。尤其是熒光抗體,對(duì)光極為敏感,因此在所有的實(shí)驗(yàn)階段也是要避光操作的!
· IgG3的同型對(duì)照:永遠(yuǎn)保存在4oC,避免凍起來(lái)。因?yàn)槿绻霈F(xiàn)凍融過(guò)程,該抗體非常容易形成多聚體
無(wú)論是保存還是運(yùn)輸,避免反復(fù)凍融!
反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致抗體變性,導(dǎo)致多聚體形成,從而降低抗體的結(jié)合能力!
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