Strep-Tactin XT Resin試劑瓊脂糖凝膠FF 是一種將Strep-Tactin XT共價(jià)交聯(lián)在瓊脂糖凝膠微球上，形成的生物親和層析分離介質(zhì)。該純化介質(zhì)主要用于

純化Strep tag II 或Twin strep tag標(biāo)簽蛋白。Strep tag II 標(biāo)簽為8 個(gè)氨基酸的小標(biāo)簽（WSHPQFEK），由于標(biāo)簽小，

僅為1kDa 左右，一般不影響融合后蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能，常用于融合表達(dá)蛋白質(zhì)的檢測(cè)和純化。

由于Strep-Tacin XT對(duì)Strep tag II 標(biāo)簽具有高度特異性，一步純化就能獲得高純度的蛋白質(zhì)樣品。Strep tag II 標(biāo)簽蛋白與凝膠

結(jié)合后可使用脫硫競(jìng)爭(zhēng)方式進(jìn)行洗脫，該洗脫方式比較溫和，對(duì)蛋白影響極小。 由于Strep-Tactin對(duì)Strep tag II

標(biāo)簽具有很強(qiáng)的吸附能力，在生物的洗脫過(guò)程中不易洗脫，造成洗脫效率較低?？梢酝ㄟ^(guò)在脫硫洗脫液中添加25mM NaOH

來(lái)提高蛋白回收效率，而添加NaOH后會(huì)造成Strep-Tactin從填料上脫落，進(jìn)而污染純化蛋白。

本產(chǎn)品為升級(jí)的Strep-Tactin XT，其可耐受高濃度的NaOH洗脫（0.5M），除此外Strep-Tactin XT可耐受1%SDS、6M尿素

，因此使用該填料可以在變性條件下純化標(biāo)簽蛋白。

組分

50％的懸浮液（20％乙醇）。

優(yōu)勢(shì)

Strep-Tactin Resin缺點(diǎn)Strep-Tactin XT Resin優(yōu)點(diǎn)

(1)常規(guī)3mM D-biotin洗脫，洗脫效率較低。(1) 可采用多種洗脫模式；高效的洗脫率，靈活的洗脫條件。

(2)填料再生成本高，需要HABA再生，再生時(shí)間長(zhǎng)，再生后填料結(jié)合能力下降較多，一般難以再生3次以上。(2)方便的填料再生方式，通?？芍貜?fù)使用10次以上。

(3)不能在變性條件下純化蛋白。(3)可以在變性條件下純化蛋白。

(4)洗脫蛋白中會(huì)有殘留脫落的Strep-Tactin蛋白(4)洗脫產(chǎn)物中不含有脫落蛋白，獲得最高純度的蛋白制品。

主要技術(shù)指標(biāo)

基質(zhì)                4%瓊脂糖凝膠微球PH耐受性               2~13

配基                Strep-Tactin XT耐鹽性                    <2M NaCl

配基密度        >5 mg/mlSDS耐受性             <2%

粒徑                45~165 µM(還原劑耐受性       <10mM DTT，<0.1% beta-ME

結(jié)合蛋白量    ≥6 mg/ml變性劑耐受性        <6M尿素

儲(chǔ)存

4°C保存，切勿凍存。

Strep-Tactin XT Resin試劑恒溫?cái)U(kuò)增使用策略及實(shí)例展示

應(yīng)用實(shí)例1：在以A3824-03或 A3828-03，用 LP1002引物組進(jìn)行的LAMP測(cè)試。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標(biāo)準(zhǔn)定量PCR儀或恒溫?zé)晒鈨x上進(jìn)行反應(yīng)。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板，1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應(yīng)25min的檢測(cè)結(jié)果，可以看到檢測(cè)反應(yīng)<20min(達(dá)平臺(tái)期)。

應(yīng)用實(shí)例2： 用 LP1002引物組進(jìn)行的LAMP測(cè)試。OG變色法為終點(diǎn)變色策略，在反應(yīng)結(jié)束后，倒置反應(yīng)管，溶解管蓋上染料后，陽(yáng)性樣本呈現(xiàn)出醒目的綠色，陰性表現(xiàn)出橙色，區(qū)分明顯。且該方法不受樣本類(lèi)型限制，雜質(zhì)耐受性很好。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板，1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應(yīng)20min后檢測(cè)結(jié)果。

應(yīng)用實(shí)例3：A3825-01 紅黃變色反應(yīng)（肉眼觀察）

以 體外轉(zhuǎn)錄 RNA 為模板，1-6分別為1、10 、100、1000、104和106Copy，NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結(jié)束反應(yīng)起

始前，下圖為 65 度反應(yīng) 30min 后。

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