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什么是賽默飛Thermo實時熒光定量pcr儀

2025-1-9  閱讀(187)

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賽默飛(Thermo Fisher Scientific)實時熒光定量PCR儀是一系列用于生命科學(xué)研究、臨床診斷和工業(yè)應(yīng)用的高性能PCR檢測設(shè)備。這些儀器通過實時監(jiān)測PCR擴(kuò)增反應(yīng)中的熒光信號變化,對目標(biāo)DNA/RNA分子進(jìn)行定量分析。賽默飛的實時熒光定量PCR儀涵蓋了不同通量需求和應(yīng)用場景的多種型號,包括QuantStudio系列,如QuantStudio 3(貨號:A28136)、QuantStudio 5(貨號:A34322)、QuantStudio 6 Pro(貨號:A43193)、QuantStudio 7 Pro(貨號:A43195)、QuantStudio 12K Flex(貨號:4471073)等。

以下從技術(shù)原理、技術(shù)特點(diǎn)、主要型號及應(yīng)用領(lǐng)域四個方面對賽默飛實時熒光定量PCR儀進(jìn)行詳細(xì)介紹。


一、基本原理

賽默飛實時熒光定量PCR儀利用熒光定量PCR技術(shù),在PCR反應(yīng)過程中通過熒光信號檢測DNA或RNA分子擴(kuò)增的動態(tài)變化,提供實時定量結(jié)果。其工作原理如下:

1. 熒光標(biāo)記

  • 目標(biāo)核酸分子通過熒光染料(如SYBR Green)或熒光探針(如TaqMan探針)進(jìn)行標(biāo)記。染料或探針與核酸結(jié)合后,其熒光強(qiáng)度隨核酸濃度變化而增加。

  • 熒光探針在PCR擴(kuò)增過程中由Taq酶的酶切作用釋放熒光信號,從而實現(xiàn)特異性檢測。

2. 實時監(jiān)測擴(kuò)增過程

  • 儀器通過光學(xué)檢測系統(tǒng)實時捕捉熒光信號,監(jiān)測擴(kuò)增反應(yīng)的動態(tài)變化。

  • 熒光信號的強(qiáng)度與目標(biāo)分子數(shù)量成正比,反映了核酸的初始濃度。

3. 數(shù)據(jù)分析

  • 系統(tǒng)根據(jù)熒光信號的Ct值(循環(huán)閾值)與標(biāo)準(zhǔn)曲線,計算目標(biāo)核酸的絕對濃度或相對濃度,最終實現(xiàn)定量分析。

這種技術(shù)不僅能對目標(biāo)核酸進(jìn)行定量檢測,還可以用于基因分型、SNP分析、突變檢測及高分辨率熔解曲線分析(HRM)。


二、技術(shù)特點(diǎn)

賽默飛實時熒光定量PCR儀以其高性能、靈活性和智能化設(shè)計而聞名,主要技術(shù)特點(diǎn)包括:

1. 多通道光學(xué)檢測

  • 儀器配備高靈敏度光學(xué)檢測系統(tǒng),支持多個熒光通道(最多可達(dá)6個或更多)。

  • 適配廣泛的熒光染料和探針,如FAM、HEX、ROX、Cy5、VIC等,支持多重PCR檢測。

2. 高效熱循環(huán)系統(tǒng)

  • 快速升降溫:熱循環(huán)模塊升降溫速率高達(dá)6℃/秒,大幅縮短實驗時間。

  • 溫度均一性:溫控精度高達(dá)±0.2℃,溫度均一性優(yōu)于±0.4℃,確??组g反應(yīng)一致性。

3. 智能化軟件功能

  • 實時數(shù)據(jù)分析:提供絕對定量、相對定量、基因分型、突變分析及高分辨率熔解曲線分析功能。

  • 自動化數(shù)據(jù)處理:儀器可自動計算標(biāo)準(zhǔn)曲線、Ct值及相關(guān)分析結(jié)果,生成直觀的實驗報告。

  • 遠(yuǎn)程管理:通過Thermo Fisher Connect云平臺實現(xiàn)遠(yuǎn)程監(jiān)控與數(shù)據(jù)共享。

4. 模塊化與通量靈活性

  • 支持96孔板、384孔板、8連管、單管及TaqMan Array卡等多種耗材。

  • 模塊化設(shè)計,用戶可根據(jù)實驗需求選擇不同通量配置(例如QS12K支持12,000個反應(yīng)孔的高通量篩選)。

5. 兼容多樣化應(yīng)用

  • 兼容SYBR Green法、TaqMan探針法、熔解曲線分析及SNP基因分型技術(shù)。

  • 適用于單靶點(diǎn)檢測、多靶點(diǎn)檢測及大規(guī)模高通量檢測。


三、主要型號與貨號

賽默飛的實時熒光定量PCR儀涵蓋從基礎(chǔ)實驗室需求到高通量科研需求的多種型號,以下為主要型號及其特點(diǎn)和貨號:

1. QuantStudio 3

  • 貨號:A28136

  • 特點(diǎn):面向初學(xué)者和中小型實驗室,支持96孔板格式,靈活且易操作。

  • 應(yīng)用:基因表達(dá)研究、小型實驗室核酸檢測、教育用途。

2. QuantStudio 5

  • 貨號:A34322

  • 特點(diǎn):適合科研及應(yīng)用實驗室,具備高精度光學(xué)系統(tǒng)和用戶友好界面,支持多達(dá)5個熒光通道。

  • 應(yīng)用:基因分型、基因表達(dá)分析、小型基因組研究。

3. QuantStudio 6 Pro

  • 貨號:A43193

  • 特點(diǎn):集成人工智能功能,支持自動化數(shù)據(jù)分析與遠(yuǎn)程操作,兼容高通量檢測。

  • 應(yīng)用:中型實驗室的基因表達(dá)研究、基因組突變檢測。

4. QuantStudio 7 Pro

  • 貨號:A43195

  • 特點(diǎn):多達(dá)6個熒光通道,支持更復(fù)雜的基因分型和高通量應(yīng)用,帶有AI輔助分析功能。

  • 應(yīng)用:復(fù)雜遺傳學(xué)研究、高通量基因組研究、臨床研究。

5. QuantStudio 12K Flex

  • 貨號:4471073

  • 特點(diǎn):超高通量PCR平臺,支持TaqMan Array卡和384孔板,可實現(xiàn)一次性檢測多達(dá)12,000個反應(yīng)。

  • 應(yīng)用:大規(guī)?;蚝Y選、高通量基因分型、藥物篩選及大規(guī)模臨床研究。


四、應(yīng)用領(lǐng)域

賽默飛實時熒光定量PCR儀在多個領(lǐng)域具有廣泛應(yīng)用,包括基礎(chǔ)科研、臨床醫(yī)學(xué)、農(nóng)業(yè)科學(xué)及工業(yè)應(yīng)用:

1. 生命科學(xué)研究

  • 基因表達(dá)分析:通過SYBR Green或TaqMan探針分析目標(biāo)基因的表達(dá)水平。

  • 突變檢測:精準(zhǔn)檢測基因組中的點(diǎn)突變或小插入/缺失。

  • 拷貝數(shù)變異(CNV)研究:量化基因組中拷貝數(shù)變化,為疾病研究提供數(shù)據(jù)支持。

2. 臨床研究與診斷

  • 病原體檢測:快速檢測病毒(如病毒)、細(xì)菌及其他病原體核酸。

  • 癌癥分子診斷:分析腫瘤相關(guān)基因的突變、甲基化或表達(dá)水平。

  • 藥物基因組學(xué):研究個體基因?qū)λ幬锎x的影響,為精準(zhǔn)醫(yī)療提供依據(jù)。

3. 農(nóng)業(yè)科學(xué)與環(huán)境研究

  • 轉(zhuǎn)基因檢測:定量檢測轉(zhuǎn)基因作物中的外源基因,為食品安全提供技術(shù)支持。

  • 植物病害檢測:篩查植物病原體核酸,促進(jìn)病害防治研究。

  • 環(huán)境微生物檢測:量化水體、土壤等環(huán)境樣本中的微生物核酸。

4. 工業(yè)與藥物研發(fā)

  • 食品安全檢測:檢測食品中的致病菌或非法添加物核酸。

  • 藥物篩選:通過高通量分析藥物靶點(diǎn)基因表達(dá),提升新藥開發(fā)效率。

  • 工業(yè)生物技術(shù):優(yōu)化微生物發(fā)酵中的關(guān)鍵基因表達(dá)。


五、儀器優(yōu)勢

賽默飛實時熒光定量PCR儀因其技術(shù)性能和多樣化應(yīng)用場景,成為科研及工業(yè)領(lǐng)域的理想選擇。主要優(yōu)勢包括:

  • 高精度、高靈敏度的熒光檢測系統(tǒng),確保實驗結(jié)果的可靠性。

  • 靈活的通量選擇,從低通量到超高通量滿足不同實驗需求。

  • 智能化操作界面與自動化數(shù)據(jù)分析功能,提高實驗效率。

  • 強(qiáng)大的兼容性和應(yīng)用范圍,支持多種實驗類型與試劑配置。

  • 數(shù)據(jù)安全性和可追溯性,結(jié)合云平臺實現(xiàn)遠(yuǎn)程協(xié)作與管理。


六、總結(jié)

賽默飛實時熒光定量PCR儀是分子生物學(xué)研究和應(yīng)用的核心工具,憑借其高精度、多功能性和靈活性廣泛應(yīng)用于基因表達(dá)研究、病原體檢測、藥物研發(fā)及環(huán)境科學(xué)等領(lǐng)域。QuantStudio系列不同型號(如QuantStudio 3、5、6 Pro、7 Pro、12K Flex等)提供從低通量到高通量的多樣化選擇,以滿足實驗室和工業(yè)領(lǐng)域的不同需求。其優(yōu)秀的性能和人性化設(shè)計,為分子生物學(xué)研究提供了高效、可靠的解決方案。


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